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MSC原代培养,一般成鼠,如200g,可以一次提多少细胞?是股骨和胫骨都提吗? [复制链接]

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楼主
发表于 2011-8-5 10:16 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
MSC原代培养,一般成鼠,如200g,可以一次提多少细胞?是股骨和胫骨都提吗?
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沙发
发表于 2011-8-8 23:29 |只看该作者
一般都是用4w雄性sd大鼠约100克,取双侧股骨和胫骨,培养25cm塑料瓶两只,你仔细看看书《细胞培养》
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藤椅
发表于 2011-8-9 15:08 |只看该作者
200g大鼠以是成年大鼠,一般说来是大了一些。但是也可以用,我们即用过骨髓MSC原代细胞的培养,为了尽可能多的获取细胞,双股骨、胫骨都要取,要注意的是细胞的分离,只有分离好了才能获得较多的原代细胞。
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板凳
发表于 2011-8-18 12:56 |只看该作者
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本帖最后由 chenyuemily 于 2011-8-18 12:56 编辑
0 o$ M  I. I' J- r" j" s1 ~- w( R. X" g8 W4 m% [
200g大吗?那取6-8weeks的老鼠是不是可以呢?记得文献中是这么说的吧,我用的是全骨髓贴壁法培养的,一般可以做一次得到10^8个细胞,种两个10cm的dish,刚种下去好密好密,大家是24h换液还是48h换液?看有的人是第一次半换液,有的是第一次全换液,第二次半换液,到底该怎么换呢?
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报纸
发表于 2011-8-24 21:10 |只看该作者
200大了  我一般用的是4-6w  这个细胞我做了差不多一年  但是最近遇到一个问题  我冲骨髓腔200目过滤后直接培养没有再离心重悬  以前也是这样做的  但是不晓得为什么现在到第二天培养液就会混浊  细胞漂浮没有贴壁的??
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地板
发表于 2011-8-26 10:02 |只看该作者
第一批原代刚种下细胞的时候不就是混浊的吗,那是有太多血细胞和杂细胞,我过70um的细胞筛后离心的,离心下来后发现是红色的,不知道做离心的同志们是不是也看到红色,我用的是全骨髓培养法
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发表于 2011-9-29 08:44 |只看该作者
回复 chenyuemily 的帖子# b. m& X0 p4 K. S. \, u1 v
7 P+ L; V5 |& u! w6 g9 U
然后你几天换液呢  看到一篇文献说4、5d换  也有说一天换  看着黄色混浊的颜色我就觉得担心
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