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[请教] 细胞污染, 请问是哪种菌? 怎么挽救. 谢谢   [复制链接]

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包包
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楼主
发表于 2011-8-15 16:46 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
最近养的细胞被污染了, 悲剧啊. 貌似是霉菌, 但不确定, 这方面没什么经验, 拍了几张不同分辨率的图请大家鉴定下..
" i: B" @* Z6 Q+ t5 g, b
3 q2 t7 Z' c) f, S  l出现这个后, 我在培养基里加了双倍的双抗, 大概三四天后有些效果, 但好像一直不能完全去除干净, 前几天把双抗降低到工作浓度,  这个又长起来了, 郁闷阿...: g# ?2 \9 R) Q0 a8 ~0 S
' P+ @( i+ d5 Q4 P# U5 q4 `) X
请问各位这个是什么污染, 怎么能除掉? 多谢了
' _# o" ]6 B5 G, b msc-cg-19-2-_0001.jpg
% W0 X+ j; g1 I, e; ?( ^6 u msc-cg-19-2-_0002.jpg 9 N* D0 u2 C1 h( L  @9 E) }
msc-cg-19-2-_0004.jpg
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沙发
发表于 2011-8-15 17:09 |只看该作者
只看到图感觉判断不出来。。。。哎。。。本人水平不够,但是霉菌再放大点是可以看到菌丝体的,而且菌丝有多细胞核和单细胞核,真的是霉菌的话就别要了,因为霉菌生长速度很快,而且会消耗大量营养,干细胞不是对手。。。而且菌丝体弥散的很快的。。。。有可能污染别的培养瓶
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金话筒 优秀会员 美女研究员

藤椅
发表于 2011-8-15 17:20 |只看该作者
我的细胞也曾污染过,不要幻想挽救了,把整瓶都扔掉,彻底消毒。干细胞要分开培养箱养。
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板凳
发表于 2011-8-15 17:24 |只看该作者
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最好的方法是直接把细胞扔了,而且要尽早。这样加双抗去杀,很难去干净,还有可能危害到其他的细胞。
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报纸
发表于 2011-8-15 18:23 |只看该作者
1.肯定不是霉菌污染,双抗对霉菌无效,并且霉菌首先看到的是菌丝。( H* r% e3 `3 k7 f
2.可能是细菌污染,很像葡萄球菌污染。
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地板
发表于 2011-8-15 19:44 |只看该作者
以前培养细胞好像碰到过你照片中的这种情况,这种东西在细胞表面生长,数量多了就成团聚集在细胞表面或者脱落到培养液中,对细胞生长没有太大的影响,抗生素没有作用,40度处理没有作用。传代过程中如果开风的话,可能会污染其他细胞。污染物的来源可能是血清的导致的。
; \6 M% T. y6 J9 T这个东西很难去除,建议你把污染的细胞全部扔掉另外再复苏冻存的细胞种子;用过的血清和培养液扔掉;无菌操作台和无菌室进行彻底杀菌处理。  s- T$ D) J7 p5 A+ a" ]( ^
如果你的细胞比较娇贵,只能在传代的过程中多次漂洗细胞表面,经常的更换细胞培养瓶或者培养板,以减少这种物质的数量。另外,每次传代时一定要保证细胞处于旺盛的增殖分裂状态(也就是不要等到细胞长满单层了、处于生长的平台期再去传代),在一定程度上可以暂时减少这种物质的数量。
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发表于 2011-8-15 23:14 |只看该作者
本帖最后由 oucflora 于 2011-8-15 23:19 编辑
: s1 @" ]0 N8 r7 r: h: R( l
$ _3 \  n: A5 \. j% M" H7 L补充一点。关于你细胞中污染的这个东西,可能是来自于上述所说的血清,还有一种可能是你们所培养的其他细胞系,建议你仔细检查实验室所培养的其他细胞,一旦发现污染了这个东西,最好全部丢掉(包括曾经用于培养被污染的细胞的培养液和血清)。如果细胞珍贵,不能丢弃,切记换液和传代过程中关闭超净工作台的风,实验结束后,把工作区域用酒精仔细擦拭后紫外或臭氧处理。不然极有可能会污染其他的细胞系;
9 m3 K7 M/ F0 E, }# i最好呢,是使用单独的超净工作台培养污染了这种东西的细胞系。
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发表于 2011-8-15 23:31 |只看该作者
干细胞不好养,但还是提醒你赶紧扔掉:理由1救不回来,细菌增殖的能力远远大于干细胞2避免交叉污染3双抗只能起到抑菌,不能完全杀灭细菌的。
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发表于 2011-8-16 02:18 |只看该作者
灾难,扔了该细胞和相关的细胞, 彻底消毒,另外,细胞培养箱也需要彻底消毒,注意,细胞培养箱有个有风扇的地方需要换FILTER(过滤器),要不,污染还会继续,
; ^8 O1 y2 j# V% o! W8 M% Z) M/ Y8 h+ F+ K: [. G% Q0 F$ b
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发表于 2011-8-16 09:00 |只看该作者
感觉像是细菌的污染。你的细胞要是非常珍贵,你就用双抗冲洗几次,然后培养基中多加些双抗培养。这瓶留在这个培养箱中培养,其余未污染的细胞移至其他培养箱(移之前要用酒精仔细擦拭培养瓶)。如果你的细胞不是很重要,那你就直接扔了。好好处理一下培养箱及细胞间。
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