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仁心-妙术

干细胞原代培养难度大（1）细胞密度难以控制，杂质细胞数目多，纯化困难（2）合理控制血清浓度，避免发生老化（3）换液时间，需要一定经验。密度大了换液要勤，密度小时间可以延长（4）细胞活性相对细胞数目对细胞增殖的影响更大----个人经验：处于对数期的细胞，增殖能力很强，未消化的细胞哪怕是十几个也可以长满瓶子。老化的细胞即使达到70-80%融合，也很难增殖，甚至凋亡。（5）细胞融合是指局部的克隆而不是相对整个瓶底面积，局部长满80-90%就要传代。不要放弃，我原代的细胞数目也很少，10天了才长出几十个，但扩增的非常快。

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回复 black 的帖子7 h' Y& f) a7 K& Q! s
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原代长到80%-90%融合就可以传代，时间与血清浓度、细胞密度有关，我用了大约20天（担心细胞长不出来，血清浓度偏高所以速度较快），我实验室另一位的原代用了一个月。