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[请教] Northern blot和qPCR的结果,哪个更可靠些?   [复制链接]

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金话筒 优秀会员

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发表于 2011-8-22 10:21 |只看该作者 |正序浏览 |打印
Northern blot和qPCR的结果,哪个更可靠些?
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发表于 2011-10-11 13:43 |只看该作者
基于PCR的东西结果都不大稳定,误差较大,所以要做技术重复,而且qPCR要获得好的结果,一般要基于几个假设拉,分子杂交就不一样,真刀真枪,有多少就有多少结果,根本不用换算拉。所以qPCR几天时间可以出几个基因,杂交难度大,做的好的结果一目了然,可信度很高。
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发表于 2011-10-11 00:26 |只看该作者
各有特点,不过现在是倾向用qPCR,可以选用Takman的探针,灵敏度挺好的。
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发表于 2011-10-10 19:00 |只看该作者
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说实话,RT-pcR 理论上很好的,但太容易受到各种条件影响,结果的重复性不那么好,个人倾向于杂交
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发表于 2011-9-15 11:56 |只看该作者
northern 一般做定性分析,不太好做定量分析,QPCR一般用来做定量分析
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发表于 2011-9-15 01:45 |只看该作者
完全取决于你的实验目的,你若是要检测基因在mRNA水平的表达情况,就用qPCR,若是检测翻译后期蛋白的表达情况就用western blot。如果你要看基因在不同水平表达的差异,就两者结合起来做。即:了解你自己的实验目的和各种实验方法的目的!
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发表于 2011-9-2 11:26 |只看该作者
我也举得Q-pcr,但是q-pcr人为因素大很多,操作要细致得多,最好还是两方面结合起来吧,多结合两面的结果思考一下,各个实验步骤考虑一下,避免由于实验操作原因造成误差。很难说那个更好一点,看个人吧。
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发表于 2011-8-30 09:44 |只看该作者
最好Northern blot和qPCR都做了并且结果一致,这样更有说服力。
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发表于 2011-8-30 09:27 |只看该作者
我觉得langziforever 同学说的很正确。杂志还是很倾向于northern的结果的,我以前投过一个小RNA的文章,杂志社就比较倾向 northern blot。至于qPCR,确实受人为因素影响多一些,但是将是主流的方法。
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发表于 2011-8-30 08:43 |只看该作者
哥们,我记得你前几天问的是WB和qPCR啊。今天怎么又改成Nb了呢?     这个要看实验目的了。不是随意安排实验项目的。但是要是都可以,就看你操作熟练程度及准备工作了。但是要是硬比的话qPCR会准确些。。
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