CIK细胞培养问题

pauldong

回复 xuchao717 的帖子7 t. e! t$ U( u  ?/ r

# O/ h6 z3 v1 b. E) A. b1 v+ m1. 一般接种当天加IFN-r，第二天加CD3单抗、IL-2，IL-1根据情况加不加都行，主要是增强细胞杀伤性，对细胞增殖不起作用，也有提前将CD3单抗在瓶底包被的，个人感觉扩增效果差不多，而且操作复杂一些。然后第3-4天就可以补液了，可以根据计数结果按照7-8*10的5次方密度补液，操作熟练了之后可根据经验判断，一般加倍补液，之后基本上细胞生长良好的情况下隔一天就得补液。
2 B, Z0 i: U, V  t6 ^5 j2. 初期使用瓶子养的，但是一定要平放，而且补液多的情况下要传更多瓶子，我们一般到240ml后就转袋培养了，不然以后操作那么多瓶子很麻烦。
, u* t( V" U% k6 |( K% A4 R8 }3. 躺着培养，细胞之间密度依赖合适，对营养需求分布的也比较均匀，不然细胞都被重力作用沉到瓶底了，空气交换也受影响。* y  I% ^; L: `9 x/ P8 N  ~% A
4. 培养DC时需要将细胞贴壁两小时，然后把悬浮细胞取出培养CIK，如果只培养CIK则没有必要，过夜也没有影响，正常培养就好了。