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求教:有没有转染原代小鼠胚胎成纤维细胞效率比较高的脂质体? [复制链接]

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楼主
发表于 2011-8-26 17:28 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
请教各位:7 h( {, o: `( O( m( k& w) w
我们自己取的原代小鼠胚胎成纤维细胞,想用脂质体做瞬转。但是一直没找到合适的试剂。
$ N4 L% L- \* B) \现在已经试验了两种:英俊公司的lipo2000和罗氏公司的X-tremeGENE HP DNA Transfection Reagent ,转染的GFP质粒。3T3细胞还可以,效率基本在20%-30%。但是MEF细胞几乎没有荧光表达。请问各位有没有适合原代小鼠胚胎成纤维细胞的脂质体?# ^& y. `: R: L( Q% Y8 E9 S
谢谢!
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沙发
发表于 2011-8-26 17:42 |只看该作者
回复 yuyan 的帖子  `" P% V, C, Y( f! n- W

( F+ y/ f+ e3 t! j  W# W不用病毒么?8 Z4 {4 W$ U4 e5 X+ z7 }
或者电转
! c0 K0 N. `" z3 ~: d4 `# A7 i
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藤椅
发表于 2011-8-26 18:27 |只看该作者
lipo2000和Fugene应该都可以啊,看看你的转染方法是不是正确,还要摸清楚质粒和脂质体的比例以提高效率。怀疑不是你们的质粒有问题,就是你们的脂质体买假了。
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板凳
发表于 2011-8-27 15:18 |只看该作者
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回复 gact 的帖子
- m" A1 D. D6 f8 U" m8 b: ~* {, ?( A
; F0 z- i; g4 S$ y2 F4 v2 T: P本打算先瞬转看下结果,后面是要做病毒的。3 h2 o& }( {: M/ A+ ^0 b# u3 `
电转成本太高了呀,呵呵~~

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报纸
发表于 2011-8-27 15:20 |只看该作者
回复 gact 的帖子
. h# c; D. Z8 j7 N  }- f( p1 G2 [- f% ?9 e
脂质体转细胞系是没有问题的,就是原代细胞的效率太低了。
& \4 u& ^, |' T' Q" o* V( q我们再调整一下比率试试吧。
8 f; F6 L& m% `- |6 ^谢谢啦~~
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