求教：有没有转染原代小鼠胚胎成纤维细胞效率比较高的脂质体？

yuyan

请教各位：7 k# l" E; r  U" Z
我们自己取的原代小鼠胚胎成纤维细胞，想用脂质体做瞬转。但是一直没找到合适的试剂。
% V1 l3 ^9 B3 S" D* n0 g* s, |现在已经试验了两种：英俊公司的lipo2000和罗氏公司的X-tremeGENE HP DNA Transfection Reagent ，转染的GFP质粒。3T3细胞还可以，效率基本在20%-30%。但是MEF细胞几乎没有荧光表达。请问各位有没有适合原代小鼠胚胎成纤维细胞的脂质体？
; ?5 e* X+ Y8 Z8 `# [谢谢！

gact

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- o  v/ [) N% z$ ]( G+ n% m( Y/ E; K' a, o4 J! O* Y
不用病毒么？: V  V" h/ }3 X# c
或者电转
& l/ r/ ?  }/ @7 P1 F1 A1 I+ o6 D

张也行

lipo2000和Fugene应该都可以啊，看看你的转染方法是不是正确，还要摸清楚质粒和脂质体的比例以提高效率。怀疑不是你们的质粒有问题，就是你们的脂质体买假了。

yuyan

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1 J& d7 M- P! o# U# m. n
5 m5 l. ~1 j% R0 T" o) C9 }! R本打算先瞬转看下结果，后面是要做病毒的。( ]. Q7 p" H9 a5 Z+ O
电转成本太高了呀，呵呵~~

yuyan

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7 N7 q8 g8 Q! m
脂质体转细胞系是没有问题的，就是原代细胞的效率太低了。
* O5 Z6 y# z6 c( P, [我们再调整一下比率试试吧。
4 A" ~% P+ m/ ?$ I$ m谢谢啦~~