这样的MEF能不能使用？？

nibirucome

: U. p6 ]6 x6 q0 `
3 d' U: N0 o& n6 b* B7 t6 G这个是P2的MEF 不知道这种状态的MEF能否使用？感觉第三张图高倍下拍得上面有很多黑点 不知道什么东西是不是老化了？
! b' r( F% Q7 w' B& }9 ^! r一般ES培养是MEF铺板密度是多大呢,有没有原始文献？谢谢！！

2011-9-1 11:19 上传

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MEF-1

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MEF-2

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MEF-3

dilal

可以用，细胞密度有些低，要再密一点才行，而且里面有杂细胞存在。细胞状态不是很好，有些老化了。MEF培养过程中会出现一些小黑点，不必太担心。

dongxin

似乎有死细胞,传代时多洗两遍试试;此外,细胞密度需加大,再看看状态!祝好运

llecstem

有杂细胞，可以传代之后第二天多洗几篇

gact

回复 nibirucome 的帖子
4 N+ H; d( ^5 p# p: \6 q6 i/ m4 _) c: ?; |9 w
第一张里面的是接种的ES细胞么？？0 X8 f- X) S# M- r- o) m
几天的状态？

nibirucome

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3 s( w! {5 s' J; V" [. `. T( T/ m: P6 L2 d( }( i& s' k: g* o* h9 g
没有接种ES细胞，这个是第二代的细胞！比较大的应该是杂细胞，不知道大家怎么去除杂细胞？好像单纯洗得话效果不是太好！

gact

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) B0 r# y) D/ J. B. F' F0 `7 X0 {5 t  r& k0 V' P
好像是干细胞的样子哦。。。一铺上去就那样的么，还是后来培养中出现的？

gact

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8 w4 z) f6 K  a* l2 c% y
好像是干细胞的样子哦。。。一铺上去就那样的么，还是后来培养中出现的？

future007

饲养层中的密度比这个稍大一点就行，不能太密太稀，密了需呀频繁换液容易造成干细胞分化，太稀饲养层LIF分泌不足，同样分化。你最好参考小鼠胚胎操作指南再做，咱们论坛中有这本书，搜搜吧

tanguixiang

培养基里面可以加点巯基乙醇，这个密度养小鼠胚胎干细胞可以了，养人的可以再稀点，P2的细胞可以再传2代，想去掉杂细胞在传代的时候一定要都消化打散成单细胞悬液，那样后面的细胞就均一并且状态也比较好，做FEEDER有的还要看小鼠品系的