MSC 冻存问题

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10%的DMSO、40%胎牛血清、50%培养基（我是用的低糖DMEM）; _, H/ b" a3 ~# \; `
4摄氏度放40分钟、零下20度放30分钟、再放零下80度、放24H就可以放液氮罐保存了
" X! ]+ h* @1 _, L$ m一般就放-80度保存) `; X& D( h2 X: B8 o& w) Z
如果有程序降温盒就省事了，直接零下80
" @6 w  k6 a% F; d# U1 S9 e4 p5 j复苏效果很好" b9 P- @6 [! I# v1 s4 X$ h
冻存的细胞融合度80%左右吧！9 y* R0 M4 h4 S8 @
如果冻存细胞多要先把冻存液配好放四度冰箱，因为DMSO放热，刚加进去和容易损伤细胞，常温DMSO对细胞毒性也大。3 O$ d- K: n% ^! K
复苏细胞我用的42度水浴，速度要快，不能有冰晶。2 R+ J- V- u$ S( n- ~5 e+ w( N
取细胞加入准备好的20ml培养基中，离心。重悬，培养
" N. G4 O5 k4 x5 n5 D5 }8 T. Z希望能对你有帮助

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用完全培养基就是1:3:6

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8 D5 i$ Y/ V3 K6 U
8 O. ^3 \7 L& {7 F8 [) u要慢冻速溶

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4 M0 y( [: L* i, J8 D
3 }/ O8 y' D& K我复苏细胞一直用的是42℃，复苏的细胞情况都非常好。
2 Z8 X; U2 j: m" V