MSC 冻存问题

hwlightning

10%的DMSO、40%胎牛血清、50%培养基（我是用的低糖DMEM）
, T: ~, Y2 }) a( m) p4摄氏度放40分钟、零下20度放30分钟、再放零下80度、放24H就可以放液氮罐保存了
% ^. Q8 G1 f' ~2 M# Z' U, l. x一般就放-80度保存' {; A3 J0 M5 Q3 ~8 s# K
如果有程序降温盒就省事了，直接零下80* `$ c$ m& Z* \' t) B+ M9 j0 b& i
复苏效果很好: K5 `8 `  V; ?$ _
冻存的细胞融合度80%左右吧！) ^- @9 L. O/ ?% Q! N) G
如果冻存细胞多要先把冻存液配好放四度冰箱，因为DMSO放热，刚加进去和容易损伤细胞，常温DMSO对细胞毒性也大。5 W1 q/ g# R: o0 b
复苏细胞我用的42度水浴，速度要快，不能有冰晶。/ C- M3 ?" k8 u4 [/ g
取细胞加入准备好的20ml培养基中，离心。重悬，培养
5 a  D# M; P7 D0 g. I5 P" B8 C希望能对你有帮助

hwlightning

用完全培养基就是1:3:6

hwlightning

回复 andylee824 的帖子' u, |' `% q7 H9 y" p
  W! _+ h& l: t3 c3 G; p3 L
要慢冻速溶

hwlightning

回复 湖南干细胞 的帖子: |6 U6 K8 z' b* J
1 O2 o/ M' ~0 I' `) Q
我复苏细胞一直用的是42℃，复苏的细胞情况都非常好。% l4 j% t* Z! s* [: F