关于细胞单克隆的问题

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      小弟最近做干细胞单克隆实验，我用P1代的干细胞做有限稀释法，接种到96孔板中，筛选出只含有一个细胞的孔板，结果发现很多细胞在孔板中不长，都已经8天了，几乎没有任何变化。师姐说是因为那些细胞不是干细胞，但是实验前我的细胞纯度已经很高了，如果不是干细胞，那么那些干细胞到哪里去了？是不是因为细胞密度太低而造成细胞生长很慢，如果这样的话，有什么好的方法可以加速细胞生长吗？现在师姐催实验结果催得很急，我也很着急呀！！！

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回复 zhusealin 的帖子& v1 B# S8 |3 d. S

5 p$ m) V" e! Q% u是皮肤来源的前体细胞（SKP），要求无血清培养基培养，加血清的话可能会分化的。

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回复 daviegao 的帖子
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$ o4 e/ B0 E2 B6 j/ z你的神经干细胞做单克隆时加血清吗？我做的SKP和神经干细胞很相似的，我想应该可以参考你的方法。

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回复 echowdk 的帖子
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/ @; V2 P0 j9 c, o主要是我取材得到的细胞是很多干细胞的混合体，而我想得到纯正的SKP用于后续试验，再说，师姐有话我敢不听吗？现在还没有到自己做主的时候。

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还有，为什么一定要一个孔里面放一个细胞呢？我想先用相对比较高一点的密度，比如一个孔里面10个或者20个细胞，等到克隆形成了，再把这些细胞稀释，找出克隆球。因为所有细胞都有密度依赖性，我想提高细胞密度可不可以提高克隆球的形成速度，想请问高手，这样做行得通吗？会不会有细胞相互集聚的现象？