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关于冻存的问题 [复制链接]

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优秀会员 金话筒

楼主
发表于 2011-9-20 08:27 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
细胞在消化完了,加入冻存液吹打的时候很容易产生气泡,而这些气泡很占体积,而且容易染菌,如果不用力吹打,细胞又不能成为单个细胞,用力又容易产生气泡,这很矛盾啊,有哪位战友能比较好的解决这个问题吗?
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沙发
发表于 2011-9-20 10:28 |只看该作者
1.气泡的主要危害应是破裂时产生的气流剧烈冲击周边细胞,但是个人经验是气泡影响不大。' t0 U+ i  |4 n4 A
2.你可以加入冻存液反复吹打时控制吸管吸入和吸出的度,保证既吸不进气体,也吹不出气体。这样柔和的吹打,几乎不会有气泡。
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藤椅
发表于 2011-9-20 10:48 |只看该作者
先把细胞吹打好后离心去上清,然后再加冻存液
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板凳
发表于 2011-9-20 11:59 |只看该作者
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建议温柔的吸进,吹出时枪头残留少量液体,这样反复吹打,应该不会产生气泡的!供参考,祝好运!
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金话筒 优秀会员

报纸
发表于 2011-9-23 15:10 |只看该作者
因为有血清的存在,所以吹打时很容易有气泡,气泡的剪切力会影响细胞的状态,还是要避免吹出气泡;
) m& [7 Q8 `: r5 n" S具体的做法是:吹打细胞的时候,吸细胞的时候把吸管或是枪头吸足液体,从吸管中打出细胞的时候,要在液面下而且不要把培养液全部都吹出来,要留下少许,然后再把吸管吸满这样反复进行,可避免吹出那么多的气泡
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地板
发表于 2011-9-25 15:27 |只看该作者
我认为,有气泡对细胞影响不大,因为冻存液只要的成分是血清,所以有气泡是正常现象,不用太过担心。如果吹打的时候不是完全吸出,少留一点液体,气泡应该不会太大,这也是我个人的建议。
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