神经干细胞怎么那么难养呢！！

angelyannan

一般都是先悬浮培养传至一代以后才贴壁培养的，主要目的是使得贴壁培养的神经干细胞纯一些。。传代后生长慢可能有几个原因：首先可能是接种密度过低，接种密度过低的话，细胞之间联系较少可能不利于其生长：另外就是你在传代过程中是否对细胞造成了严重的损伤，细胞损伤严重后可能长不好的。另外你说完全不长时什么概念呢?一般文献上所说的一代和下一代之间的时间段大概是3~5天。不过这个时间也要根据你的取材来源决定，包括细胞密度也是一样的。如果细胞真的状态不好的话建议重新在养，同时也要根据自己的取材来源查找相应文献，然后注意以上几点，试试看~

angelyannan

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' I& N2 \! w- |4 y, K两种文献我都见过的，我多看过的还是使用第一代神经球用于贴壁的较多。可能我们的实验目的不一样，所以侧重点不一样吧~觉得你的接种密度应该没有什么问题~那不知道你的培养液ph值是否正常~

angelyannan

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% X4 w3 W, j, L以前做过的，是收集大概直径为100um左右的神经球接种到PDL包被的孔板里面，贴壁培养大概6h以后做正常的免疫衣荧光。个人觉得贴壁培养的时间需要摸索，贴壁不紧的话后面免疫荧光步骤中细胞很容易被吸走。

angelyannan

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我回答的是指神经干细胞的鉴定-nestin染色，而且我回复的帖子是说神经球的免疫荧光。当然要是贴壁的也可以的~看目的是什么了。