细胞转染后的筛选

wangfang

成纤维细胞用脂质体转染后，加入筛选药后细胞大量死亡，剩下的细胞状态不是很好并且密度很小，始终都长不起来，但这一批细胞又很重要，请教高人指点迷津！

绿雪

细胞的稳定筛选是要有耐性的，祝成功！

meister

筛选多久了，有克隆吗

llecstem

两周左右才能看到克隆吧

wangfang

谢谢大家！8 y9 w& Z( J7 W
现在还没有克隆，细胞始终没有长，而且每天都有死细胞。

trl137

这得分几种情况来分析：
+ v0 [$ c$ Z; U$ v- m) t3 e1）你转染所用的成纤维细胞状态，传代次数，转染前细胞密度；' G- }8 |# r# ^! O
2）培养液中所含血清的浓度，根据本人经验，在转染前后，血清浓度最好有差异；
( d; ^+ Y" ^1 Q$ k4 [# Q! a3）你是加药筛选，所以要让细胞产生抗药性至少得需要10天，你要有耐心，况且，死细胞多是很正常的；
- d. B4 n/ l. F: q4 h6 w- j4）也或者，转染不成功，效率很低，未转基因的细胞没有抗药性，都死掉了。