图片——成骨诱导茜素红染色是否为钙结节

kgx1986

/ N6 `6 R) X( q7 U5 P
: Q+ D9 d% u# C& O9 f% H如图所示：

kgx1986

大家帮忙看一下吧

都市青蛙

好像洗得不够干净* s9 b' W9 y0 G. N3 K' _$ ]  E
不知道是否是细胞层次的
/ N+ T0 s# L8 v

luoziwei

不像，坛子里有很多照片了，你可以搜搜看一下

franklinhg

染料配置有问题！！！至少是使用前 染料中有没有完全溶解的颗粒。 可以临用时才配置，然后将配置好的染料经过滤器过滤一下在用，虽然这样后染色时间略微延长，但是结果可行度高得多。典型的钙结节在显微镜下观察，可以发现有染料作色的部分凸起，凸显出来，感觉是向眼部迎面奔来！！！

kgx1986

回复 franklinhg 的帖子9 Y5 `2 ^+ g2 E9 j& a+ \; Y) m

7 x$ i5 Z/ P- ]* j' v  h8 H2 {* W& e谢谢指导

kgx1986

回复 franklinhg 的帖子6 J2 q: Y* S2 o7 s0 u, |1 n
' d3 x9 q' h& G2 E" ^  A( Z! U
我的染液是过滤过的，还是这样，不知道为什么

kgx1986

回复 都市青蛙 的帖子8 H* Q6 u) T( k8 E
2 {. @- g; T7 J3 z) a( }, n
我觉着还是能够看出一点细胞形态的，我的染液也是过滤过的，不知道为什么总是染不好，能介绍一下你的讲演么？

franklinhg

6 L' ?3 x) Z) Q1 \; Y2 V
; k3 n( q$ B' {8 |- {
回复 kgx1986 的帖子+ A& c0 Y- ]0 i* G9 X* N

  c/ |  c& s' A! f8 d最好是详细写出你的做法  细胞来源（如果保密的话，另说—） 诱导液体配方  诱导时间 是直接接种在孔板里还是接种在盖玻片上（盖玻片经过了哪些处理)   染色操作过程（从细胞去除诱导培养基开始到最后采集图像）  8 l: D$ S- ~, y  n2 g

" w: A4 w7 j; S" n. [: R) l看你的第三图，如果是照你说的过滤了的  那很可能是你染色液的pH值和染色时间的问题。PH值不对或者是染色时间长了一点，可以多洗两次在采集图像。

kgx1986

回复 franklinhg 的帖子
& l, X7 v3 p: \  B- Z
* c& W2 f. _  F- r' L' s没什么可保密的，我的是兔子骨髓间充质，自己抽的，在6孔板里接种（后悔用玻片，染色和观察很不方便），诱导液配方：MSC诱导方案
5 A% {) {% f7 z3 Q& W成骨诱导：DMEM-HG 10FBS6 X2 n$ F+ q5 d" T
试剂                                                溶剂                加入量l/ml                终浓度                        储存浓度. ~6 v1 E6 ^3 x5 f7 N# w
-磷酸甘油                                        PBS                                10                        10mM                        1M5 Q% d( A; H* G' v7 X! y
抗坏血酸磷酸盐                                PBS                                1                        50M                        50mM4 s6 ]( u' z7 b! g9 {
地塞米松                                        去离子水                0.1                        0.1M                        1mM/ K, K. [* D# P