流式细胞术筛选后的细胞数量很少，怎么办？

Tonypan

很少是多少？
% k" |1 x' A" O0 ~有没有计数？
5 `# S6 k" y7 M; r2 D分选前有多少细胞？你的目的细胞比例有多少？$ M7 D7 I+ h7 R8 c( w
算一下回收率7 R4 h1 D* e2 W0 F6 N9 p
回收率=分选后细胞数/（分选前细胞总数*所占比例）; U: E* ^7 Z1 g8 `7 g( C" H2 N9 W8 j
回收率低的话可以适当降低流式的分选速度。
* W: [) E% M% S0 j2 H  ?4 H& `0 n' ?, {/ R' n/ f, |7 M: }: }% ~; m
很多情况下分选所得到的细胞数量少是很正常的。

Tonypan

另外，表述离心的时候尽量不要用rpm，如果用rpm就要给出你离心机的半径。不同半径离心机同样转速离心力差距是很大的。3 }3 Z& `% T" ^, F* C) k; a/ s
300g×10min离心，PBMC或肿瘤细胞都没问题。

Tonypan

对胰酶敏感的细胞marker肯定不能用胰酶消化啦$ ?6 N2 C# z  c1 K* e" Q
10E6细胞在流式管里看不到也算正常，有时候在流式管的管底有“雾雾”的一层，对着光仔细看能看到。+ q9 @; N& t2 C  W" {
10E6在1.5mlEP管里应该看你看到