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[请教] 成纤维细胞感染 [复制链接]

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包包
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楼主
发表于 2011-10-23 19:14 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
细胞状态对慢病毒感染成纤维细胞的效果有很大的影响吗?最近要做一个慢病毒感染,但是感觉细胞状态不是很好,长的很慢,而且细胞有老化的现象。
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沙发
发表于 2011-10-24 08:48 |只看该作者
细胞状态对慢病毒感染是有影响的。* _" N$ B/ g$ o3 S: K+ Q+ O% G! V
慢病毒感染细胞,是整合到宿主染色体上的,从而实现长期稳定表达。( t( C, x& u2 x# ?2 E) m8 v6 g8 W
所以细胞长势好坏,会影响到获得慢病毒的数量和滴度。
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藤椅
发表于 2011-10-25 19:02 |只看该作者
我建议如果细胞状态不是很好的话就不要转染病毒了,因为病毒转染后细胞状态还会更差,到时全部漂浮起来,你病毒都没法收,而且滴度不高。一些细胞如果已经状态不好了,很难恢复,建议还是重新复苏一个,养的过程中,勤换液,勤传代。病毒转染的细胞也不要太密,百分之七八十就好了。
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板凳
发表于 2011-10-27 10:31 |只看该作者
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先调整细胞状态。要不也不成功,时间浪费了
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报纸
发表于 2011-10-27 22:27 |只看该作者
成纤维细胞传代多了状态就不好,我前几天就做的fibroblast,本来也不是原代的,传了3代就不行了,长的可慢了!后来我小老板告诉加了促生长因子,长的还凑合!最好是原代的成纤维细胞效果好啊!
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地板
发表于 2011-10-28 09:24 |只看该作者
回复 jieniao1 的帖子
1 L0 }  S% f; e6 S' {1 \- x9 D( Y$ E! a' o0 [' p, F
请问你加的什么促生长因子啊?

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优秀会员 金话筒

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发表于 2011-10-30 22:41 |只看该作者
要做转染,最好让细胞保持最佳状态(传代次数尽量少;转染前细胞汇合度70%左右;细胞的分裂能力,生长状况良好)。病毒感染进行转染,病毒要再宿主细胞整合,以达到稳定表达,所以,细胞的状态很重要会影响效率。
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