肿瘤干细胞培养基

goodboy

我看到的肿瘤干细胞培养基一般为DMEM/F12+hEGF+bFGF，不知道适合筛选K562等悬浮细胞中的胚胎干细胞吗？

Jordan

干细胞培养基配方：1000个细胞/ml无血清DMEM-F12（Cambrex）培养基，添加10ng/mlbFGF、20ng/MLEGF，5ug/ML胰岛素和0.4%牛血清白蛋白。

goodboy

回复 Jordan 的帖子
$ W& @4 K) O  ]2 h, ?6 F, \! t
& i$ q; ^5 A$ I& i+ P, Z谢谢，我们实验室是在DMEM/F12+hEGF+bFGF基础上添加B27等，筛选出来的肿瘤干细胞都是悬浮型的，由于K562也是悬浮形细胞不知道怎么区分啊

goodboy

回复 Jordan 的帖子
9 E; Z# _6 M6 r4 _/ O
/ A1 u, i1 W$ j看到你的配方感觉有些不对呢，胰岛素作用是促进细胞分裂及分化的吧？这样的话肿瘤干细胞都分化了，还谈什么筛选呢？这只是个人意见

Jordan

是，很多都有加B27。胰岛素在这里和BSA一样都是一种营养因子，也有加肝素的。具体见附件

goodboy

回复 Jordan 的帖子) a3 f8 V* P/ F# m
/ R2 }8 W0 P! c4 ^' u$ n, {
没见到兄台的附件呢，请问在哪呢？

Jordan

肿瘤干细胞培养经典文献!

goodboy

回复 gzw874505837 的帖子7 ]3 G' U1 G5 @6 r; ]
& I: U. j6 k! F; M+ q$ E+ t. n, M
之前养过，用的1640+10%FBS+PS7 T6 Q8 ]" {( m3 h

mike19840320

胰岛素是促进葡萄糖代谢的吧

yxzxlmlf

回复 goodboy 的帖子
2 R3 K# c0 U) D+ j  \+ K6 F; e" `
5 M3 |; X: p$ ~$ F( ~: m你好，请问一下您那边是怎么传代的啊？我是1500rpm收集微球体后用PBS洗一遍，然后再离心去除PBS  加0.05%-0.53mM EDTA消化 然后就不成球了