死细胞对RNA提取质量有无影响？ - 实验室综合讨论区干细胞之家

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楼主

发表于 2011-11-2 15:11 |只看该作者 |倒序浏览 |打印

求助：最近做小鼠细胞的分选，想从分选出来的细胞提取RNA，但是分选耗时很长，不知道死细胞对RNA提取有影响不？- [' f/ K. ?' R/ v) L% E5 ^
谢谢！

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guo6259

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沙发

发表于 2011-11-2 15:17 |只看该作者

看你要做什么实验了' N: Z& k6 u: |+ n4 a8 K
是要作原代还是不同类型的细胞" y, Y2 C, j9 N n: M5 N
细胞是用什么方法筛选
差速贴壁还是带neo、tk之类的筛选标记
要说清楚才好呀！！

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maaotao

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藤椅

发表于 2011-11-2 15:19 |只看该作者

路过学习

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漫步云端0511

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板凳

发表于 2011-11-2 15:38 |只看该作者

路过学习

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星移龙一

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报纸

发表于 2011-11-2 19:23 |只看该作者

不知道你分选的是什么细胞，大约多长时间。如果分选出来的是死细胞，还有什么意思？？？' L0 y# y4 ~: V- `: ^
死细胞中一般还有RNA酶，会降解RNA。

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星移龙一

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地板

发表于 2011-11-2 19:23 |只看该作者

不知道你分选的是什么细胞，大约多长时间。如果分选出来的是死细胞，还有什么意思？？？% a, C8 T1 m0 P( v" n5 z
死细胞中一般还有RNA酶，会降解RNA。

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cronos0910

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优秀会员金话筒

7楼

发表于 2011-11-3 03:28 |只看该作者

一般来说, 死细胞的一小部分的RNA都会被RNase降解,但是还有大部分的RNA是存在的, 所以只要尽快,对RNA影响不会太大,在细胞内RNA 还能维持一段间

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goodboy

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金话筒优秀会员

8楼

发表于 2011-11-3 08:17 |只看该作者

会有影响，RNase

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srl

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9楼

发表于 2011-11-10 12:35 |只看该作者

谢谢各位热心回复，我就是将原代细胞取出来，标记上抗体，用流式筛选出某些标记的细胞，从细胞从老鼠内取出到最终分选结束，耗时超过5个小时，分选得到的细胞估计也不行了。再提取RNA。" s) G9 o8 V( P
谢谢各位啊！我尽量缩短时间吧！

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shixibao

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10楼

发表于 2011-11-11 16:12 |只看该作者

跟死亡的时间关系非常密切了

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