求免疫荧光的染色流程

lingminliang

        (1)PBS洗1次，5分钟；1 X& n6 d# p- [# e2 I
        (2)  4%多聚甲醛室温固定40分钟，PBS洗3次，5分钟次；: K& r# J: b5 a; M( R3 m
        (3)  含0.3%Triton-100X的PBS室温作用45分钟，PBS洗3次，5分钟/次；
4 k; n9 R: S: K/ W* c4 w        (4)  5%封闭液用正常羊血清室温孵育45分钟，抑制非特异性染色背景产生；: U( E8 B5 G2 I9 g
        (5)  吸去封闭液，加入一抗4℃孵育过夜；
5 k7 k" l% q& U        (6)  次日， PBS洗3次，5分钟/次；2 U5 ?8 I# @+ R" s" L
        (7)  加入荧光二抗室温避光孵育2.5小时；% |* q; d) z+ V4 P8 U' W% I" ?* q" u
        (8)  PBS洗3次，5分钟/次；
# z" H; W7 u% }- n; D# k        (9)  加入DAPI细胞核染料，室温避光孵育10分钟；) n, f% S/ b1 H9 ~2 Y
        (10)  PBS洗3次，5分钟/次；  E  o" f& d: s  t7 Y
        (11) 荧光显微镜下观察并照相。