流式 求助

leisong12

到底有没个标准啊，怎么说什么的都有，流式测免疫表型，如果一抗不带荧光，需要用和二抗（带荧光）相同来源种属的动物血清封闭，这点我可以确定，许多文章都是这样写的。不知道如果一抗是带荧光该怎么封闭啊？一概用牛血清或BSA封闭是不是不够好啊，用FcR Blocking Reagent是不是成本太昂贵了，该怎么办，有没有权威一点的解释？

leisong12

我觉得可以结合zz091115和chutu两位的观点，实际操作中可以做个预实验，看看一抗标记荧光的封不封闭差别大不大。我们用三色确定细胞群的不多，见过临床上分血细胞是三色标记的。如果只用一种荧光标记的抗体，如分选已知表面标记的肿瘤干细胞，用BSA还是和抗体种属来源相同的血清封闭呢，或者干脆用牛血清封闭，现在也是不知怎么弄才好。