细胞冻存时浓度多少合适？

haiq1984

间充质干细胞在冻存时有没有上限或下限呢？

lazyworm

我们2ml的冻存管一般是2*10的7，复苏活率大多在90以上，当然影响活率的还有很多因素。但是我挺想知道冻存液与细胞密度之间的关系。它们究竟关系密切还是在某个细胞密度范围内就可以呢。

dianying

回复 haiq1984 的帖子) d  j) U0 S& N0 j% ?- C3 M
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如果你的细胞健康的话，4x10的5次方/ml 就足够。

xiaolong

一般都是十的六次方之上，七次方之下

haiq1984

回复 刘森泉 的帖子5 _+ j- M# I3 `5 Z) ]0 T
  [- V" ]+ I9 v8 F! S  _& Z7 s
好详细，谢谢了

刘森泉

其实我们教学推荐冻存浓度是1-5*10E-5，但实际我们每次一个平皿长满冻存1-2管，肯定比10E-5大，也没有去摸过到底冻存效果怎么样，反正复苏后都挺好。5 |) n( ^, D/ \- l+ I1 V! ?

! W- r, g  [+ Y3 Y9 C; Y我们培养基：血清：DMSO=6:3:1，但是我想血清多10%关系也不是很大，我们血清最终浓度也不止30%。但是操作时不是这样直接加在一起的，我们是先配好冻存液（培养基：血清：DMSO=20%：60%：20%），放4℃。再处理细胞，胰酶消化，离心，再用培养基悬浮，最后细胞悬液和冻存液以1:1比例加在一起，加冻存液时慢点，加一滴混匀再加。冻存时需要使用冻存盒（装异丙醇），放于-80过夜再放于液氮罐，如果没有冻存盒那就自己程度降温吧，从4— -20— -80—液氮罐，各步时间再自己查查吧。
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  W# m1 w  m6 `4 G希望可以帮到你。9 d. v* i( G3 U1 l/ ~2 G& \3 W5 W
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haiq1984

回复 刘森泉 的帖子' ]/ C  X8 F4 m' D6 m

& M# W! G& P5 k( U) H% i2 ~/ T我用的培养基：血清：DMSO=5：4：1，想请问下这个配比合适不呢？

刘森泉

我觉得10的5次6次7次关系都不是很大，关键是冻存的步骤和其中的细节，还有冻存液组分配比。常见的细胞的话应该都容易，像ES和iPS这种就需要多注意，多查查问问。

haiq1984

回复 zhusealin 的帖子
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! j# N9 m) u: \5 E5 u# r* Y& b3 V恩，谢谢！这个主意好！

haiq1984

回复 yangwy028 的帖子" w6 f4 h8 @" q2 e/ k

& G6 ]: J. `2 A' j哈哈，这个不怕，我的细胞还是有点珍贵的！呵呵