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eileenyangliu

新手上路

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楼主

发表于 2011-11-19 15:44 |只看该作者 |倒序浏览 |打印

请教各位大侠，小女子刚入门学习刚干细胞，用成纤维细胞采用悬滴法产生干细胞球，但由于悬滴法产生的球数量较小，现在想扩增一下，不知如何办？？？

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金话筒优秀会员

沙发

发表于 2012-2-28 11:10 |只看该作者

为什么要用悬滴法呢？成纤维细胞是贴壁细胞，不贴壁的话会发生脱落凋亡（annoikis），你查一下这方面的资料就明白了。我可以肯定，你用悬滴法不会得到大量的细胞，会越传越少，3代后就传不下去了，呵呵，因为我们实验室也做过。; @1 x- d1 B4 G
1 f2 s1 R& H. `7 ]- x. W
我建议你还是用传统的贴壁法培养，DMEM（高糖）加10%FBS，等把细胞扩增起来后再成球，会好做些。
" v# a' y$ _+ x' |6 p! A$ a5 F3 O
或者，你用ultra-low低吸附的培养皿，细胞会悬起来成球。4 ^/ C) l n6 A

仅供你参考。