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悬滴法养出成体皮肤干细胞球的传代 [复制链接]

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包包
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楼主
发表于 2011-11-19 15:44 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
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请教各位大侠,小女子刚入门学习刚干细胞,用成纤维细胞采用悬滴法产生干细胞球,但由于悬滴法产生的球数量较小,现在想扩增一下,不知如何办???
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沙发
发表于 2012-2-28 11:10 |只看该作者
为什么要用悬滴法呢?成纤维细胞是贴壁细胞,不贴壁的话会发生脱落凋亡(annoikis),你查一下这方面的资料就明白了。我可以肯定,你用悬滴法不会得到大量的细胞,会越传越少,3代后就传不下去了,呵呵,因为我们实验室也做过。
5 D# {- P; F: x4 V& Y! x4 C6 K- d
我建议你还是用传统的贴壁法培养,DMEM(高糖)加10%FBS,等把细胞扩增起来后再成球,会好做些。4 S' ^$ ~+ k2 A& H$ D
5 T% Q: W9 V: G+ k( Y+ D8 Z" i; w2 v
或者,你用ultra-low低吸附的培养皿,细胞会悬起来成球。
; _, A/ m+ r0 g& Y7 X
6 D' A$ Y. V/ M% O仅供你参考。
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藤椅
发表于 2013-7-9 08:45 |只看该作者
不知道你还在做这个吗?使用同样的方法,形成的细胞球如何进行分化检测,不知道你有没有做到这一步?
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