这样的神经干细胞如何传代，有图

bathpp2007

昨日取12D胎鼠脑，机械吹打若干次，未酶消化，过200目，离心后接种5 S+ h3 C( `9 v
今日镜下见如此大片物，似是众多细胞粘在一起，应是吹打不足" E0 s+ N8 ?* k* O" e. E
如何去除这些东西呢？这些东西肯定会影响正常细胞吧，无论活着还是死了
+ [% ]& z& ^9 q

angelyannan

像是没有打散的组织块，也有可能是消化过度后细胞相互粘连在一起的大块。不知道是否全部是这样的？要是全部是这样的话，建议重做；要是还有部分好的神经球的话建议想培养一段时间看看也许通过传代可以除去~

bathpp2007

angelyannan 发表于 2011-11-22 18:25 , i% K7 @/ W# \) X$ N
像是没有打散的组织块，也有可能是消化过度后细胞相互粘连在一起的大块。不知道是否全部是这样的？要是全部 ...

" S* c4 ~! f& S
谢谢啊！ 全部是这样啊

ylj

一般神经原代组织接种是容易粘连到一起生长的，接种密度可以低点，多培养几天再拿出来观察。$ m4 r8 [' w, E- O! P) I2 l! {
下次在做时可以用PBS洗一到两次再接种培养，我们一般先用1000G后，加入适量液体重悬后再用200G离心收集，这样杂质就少了。

ylj

不过这个看起来更像是死细胞粘连。

bathpp2007

ylj 发表于 2011-11-24 21:59 ; @: @* u8 m3 [% ~5 @( M
一般神经原代组织接种是容易粘连到一起生长的，接种密度可以低点，多培养几天再拿出来观察。
5 p5 _1 e4 M2 t5 `( y9 ~下次在做时可 ...

  J# E, }# U: k% D) S& I9 W1 d谢谢你的热情指导。1 }2 d! R3 q$ n% q' R" x
你讲1000g之后再用200g杂质就少了，200g之后是收集沉淀还是上清？

bathpp2007

. c8 }7 o8 Y+ s5 ^. O
一周后的样子
/ g3 c, b% ~* }  d+ O& K可见那团块状的可能是NSC。没有分离成单个细胞。

细胞海洋

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bathpp2007

细胞海洋 发表于 2011-11-29 01:14 - ~2 f6 F! Y7 s) W$ v4 i5 d& ]
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0 V, R. J! c& ^# g+ W' G1 p; V收到！

tracy22

1000g离心原代细胞有点转速太大了，500g足够了