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[请教] 高GC和复杂二级结构为什么可能会导致PCR失败? [复制链接]

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楼主
发表于 2011-11-26 11:56 |显示全部帖子
这是很正常的事情,G-C三键,键能较A-T 双键更高,二级机构的情况就更复杂了,包括不仅通过折叠使分子变得稳定,也可与周围形成其他的键,所以高GC和复杂二级结构很可能导致PCR失败。
7 }0 V# t7 [. \! _+ w; w我曾经就进行过一次PCR,必须加DMOS(注意,微毒,戴手套),可以使复杂二级结构打开,效果还不错。而且这种产物转化时也要高温加热,这还是打电话问人家生物公司问来的密不外传的经验。
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