如何才能高效转染MSC?

xintianaric

最近在做一个实验，就是用荧光蛋白EGFP转染MSC，可是无论怎么设置浓度梯度也好，转染效率都很低，不知道哪位战友有做过这方面的实验，能不能分享一下经验心得？

flyingpnmc

最好用慢病毒，效率还不错。

phdyhm

转染细胞最好细胞株，能用细胞株最好不选用原代细胞，而转染方式上最好选用慢病毒，转染操作上最好是有经验的人操作或指导。此外，还要保证慢病毒的滴度足够高。

xintianaric

可是我们不用慢病毒转染，用的是脂质体转染方法，用的是康为世纪的DNA转染试剂，相比碧云天的脂质体转染试剂来说效果是最好的了，可是转染的效率还是很低，不知道有谁用过同样的方法做过转染呢？

illidancui

之前一直用腺病毒转，效率也很低。后边可能也用到脂质体转，不知道脂质体转效率能达到多少呢？

zxcv12345

回复 xintianaric 的帖子7 P2 ]( f( \- U( j. F2 n
3 W! }' O. O2 g: j% z& B# C
脂质体等转染试剂转染元代细胞的效率都不会高，* i# E% A8 _3 F' e
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效率高的有慢病毒和nucleofector; R0 P$ m6 H* c
如没有慢病毒，可考虑lonza的nucleofector电转，对有些元代细胞的效率还是可以的

zzp40

我遇到和楼主一样的问题， 用慢病毒感染MSC确实 可以达到很好的效果，但是因为实验需要，要把质粒转到细胞中，则效率很低，不知道战友们有没有好的经验可以学习的呢？

westernblot

间质干细胞外源表达基因用普通方法都非常困难，就是用慢载体转化，其表达量不高，虽然可以显著提高转染效果。建议采用病毒转染方法，一般常规方法没有什么效果，个人实验心得。EGFP应该来说，效果还是不错的。这个我做个好多来源不同的间质干细胞都没有问题。

viv2005

回复 zzp40 的帖子! U: M5 ~; i5 l% m" }: X6 t2 E
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能不能说说是怎么用慢病毒转染MSC的呢，我现在也是用慢病毒转染GFP，但是效率很低，但是之前用的腺病毒，效果还不错

luoziwei

回复 illidancui 的帖子
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