新人求教

leehomaxun

本人刚开始做干细胞，一切从零开始。
2 _6 ]1 }3 F1 E1 ?% Q现在正准备开始养ESC和iPSC，有一下几个疑问请大侠们指教。$ [* K2 m0 f, o1 G7 E
1. 我们实验室ESC和iPSC是和MEF coculture，那么复苏的ESC或iPSC是直接复苏到已经准备好的MEF上呢？还是先单独培养？
; x' Y4 d  G( B4 K. |6 y2. 如果是单独培养的话，培养板是否需要特殊处理？
7 B! h$ M1 Z3 B0 _' x: d/ X: y
8 g! W( e( K9 {3 q谢谢了！

歪歪

既然是共培养为啥要分开呢？

leehomaxun

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' ?, ~5 v! w/ p- B
$ }, Q* s: f. N因为看到的文献里是这么说的：将板子上长好的ESC或iPSC transfer到MEF上去，而我现在手头上没有ESC，需要复苏，我的问题是将ESC直接复苏到MEF上吗？

song58

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) g3 E  W0 J8 J" R& b8 t对，就该这么办。
4 l* C0 x; I1 ?) r你说的human ES吧？
7 N; i: s* M9 C6 S* N: t, I注意，feeder先用DF12或者PBS洗3次，接入预热的hESM。15ml离心管中先装1～2ml预热的hESM，把解冻的ES轻柔的移入其中。离心后弃上清，用预热的hESM重悬，接到dish里，OK了。尽量不要把ES吹的太碎了，1ml的枪吹吸一下就足够了。