关于人全长cDNA的获得

不倒翁

KOD的酶很好用 实在不行分段克隆吧

Yedan

回复 ndwzf 的帖子- p8 u; w5 |2 R
; w0 C/ I% L+ e/ S* l: {
9kb....肯定得用lenti的载体了，FUGW吧/ l2 y3 n3 \" H
至于酶，你问下Roche的人，他们有P长片段的，我用过还行，名字我记不清楚了...
) t* w4 M3 d1 l6 O, D4 g/ j如果实验室有Taq和Pfu，可以1:1混合用，这样也可以做的，P长片段我经常这么干，但是别跟老板这样，会挨骂的...

ndwzf

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3 d1 B0 h1 L5 i0 s4 [9 `9 g$ l$ G: N
怎么要呢？

zhangxl85

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: }! g3 [( n4 {) Z/ @0 n& T2 R
/ n* S! i' T% ?/ o$ M& ~3 \' R4 O真不错，谢谢！

spchsq

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$ @9 H+ l  ~+ X6 j, x, K6 r  T! a" F6 ^: r; b' b  U- X
看前面hndxws的贴子上有链接

zhuyin2010

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7 |- M. D1 O/ _! a+ z% Q  m8 s+ w( [/ Q
我也想告诉他这个。- ?, S6 O$ `% a2 D
你抢先了。: B# s& A- g% b4 w2 Z- e
其实自己扩也是没问题的

langziforever

谢谢大家，也谢谢这位韩教授，希望国内的所谓科学家们多发扬这种真正的科学精神！

莫大山

你好，我刚向韩家淮实验室索取了一个cDNA，后续想做过表达，但是关于这个菌液我还有一些不懂得地方，想跟您请教一下。2 A( {5 z" O9 g
首先，这个菌液的载体信息我没办法获得，怎么进行测序呢？; V/ p  I/ a* d" m5 O
其次，没有载体信息，我如何设计空载体进行对照呢？

莫大山

你好，我刚向韩家淮实验室索取了一个cDNA，后续想做过表达，但是关于这个菌液我还有一些不懂得地方，想跟您请教一下。5 r3 o6 P3 T1 T( l
首先，这个菌液的载体信息我没办法获得，怎么进行测序呢？
$ _- ^. q1 C# ?$ h 其次，没有载体信息，我如何设计空载体进行对照呢？

yuanyecat

你那个基因有多大，做全基因合成呢？Life tech 好像有做