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楼主: langziforever
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[请教] 关于人全长cDNA的获得   [复制链接]

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楼主
发表于 2011-12-6 15:54 |显示全部帖子
取点细胞抽RNA反转cDNA自己P吧,国内很少有买现成的,不划算,自己做一个礼拜就做完了,吃一个礼拜的饭就省了吧...
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沙发
发表于 2011-12-6 18:07 |显示全部帖子
7.5kb是有点长的了,反转录肯定没问题,你找个高表达的细胞或者组织抽RNA吧,然后就硬着头皮P吧。GL
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藤椅
发表于 2011-12-7 17:03 |显示全部帖子
回复 ndwzf 的帖子
+ F+ h8 t3 e2 j( I% W; r$ {; w7 ~$ V& A$ @
9kb....肯定得用lenti的载体了,FUGW吧
: o% a# u; I( O至于酶,你问下Roche的人,他们有P长片段的,我用过还行,名字我记不清楚了...
. }0 U/ r+ }1 c/ G' h0 r如果实验室有Taq和Pfu,可以1:1混合用,这样也可以做的,P长片段我经常这么干,但是别跟老板这样,会挨骂的...
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