MEF细胞中观察到像鱼一样快速游动黑粒！

bigsnow55

我前一段时间取材培养小鼠MEF，最近复苏，发现有两皿MEF中有很多鱼一样快速游动的颗粒，是长条形，黑色的小颗粒。游动速度奇快，而且方向比较稳定，往往朝着一个方向游去。奇怪的是，生长液颜色还是红的。
5 v+ Z5 }8 Y4 l0 f/ F2 @不知道有哪位战友见过这种现象，讨论一下。

varing

应该是污染。速度奇快？污染菌一般只是缓慢移动而已。培养基颜色不变也会污染的，很正常。
+ N7 [' ^4 ~7 E$ A1 B- ~& T( v可能原因：一、冻存前就已如此 冻存时没注意看! U4 b( b, K4 O! N# g
          二、复苏过程中操作污染：如水浴时不注意，复苏后没仔细用酒精擦拭等

歪歪

我们的也是，现在正在检测是否是支原体污染，你可以收集上清，做PCR.

歪歪

分离原代细胞，操作不小心很容易支原体污染的，虽然现在还未证实，但细胞实验和动物实验真的最好分开。

干细胞谷

听你描述应该是一种杆状菌污染，高倍镜下分节现象。双抗很难抑制此种菌污染。建议你彻底排查污染源。% {/ b' r; @' Q+ |- a; i1 t) M8 y

evial

是不是黑胶虫呀？游速很快的，做布朗运动？

hsution

支原体污染有可能 但凭楼主描述 似乎不像 当然可以做microplasma的 PCR来鉴定。R&D Systems 公司有类似Elisa原理的 MycoProbe支原体检测试剂盒。  另外还可以用Hoechst染色来看支原体污染。
8 S# v% i& N. `+ Z0 a7 ^0 O1 ?& B1 z黑胶虫经常听说 但从未见过。似乎是长得挺快的

momocy

我最近细胞也有你说的现象，你看培养基是不太清亮的，有一点浑浊，显微镜下是可以看到像糖葫芦一样的一串串在游动，就是细菌污染了，扔掉不能再要了。0 K0 e. T+ o) x. l7 z' H
前面有人说支原体污染，支原体污染你在镜下是看不见的，现象不明显，只是有少许的黑点点，但是有黑点点的时候也可能不是支原体污染，我测过。但是你的现象很明显了，是操作造成的污染。

bigsnow55

回复 momocy 的帖子
  N1 [- `. E3 {0 |- i/ {8 t( s' p2 e5 e/ u* c' y3 {+ `; y
肯定是污染，关键是什么东西污染。! ]' C  f: n; L$ j  V: B6 L
如果是细菌，应该不会这么定向游动，细菌一般都是在原地蠕动，位置移动不快，而我皿中的黑点，像米粒，快速向一个方向游动着。而且生长液也还是红的，如果是细菌，生长液往往很黄。# K: U" S& v4 K1 I0 E. e1 |
支原体更不像了。支原体肉眼是看不到的。

bigsnow55

干细胞谷 发表于 2011-12-9 23:17 0 k; Q; n% E- ]/ n! O
听你描述应该是一种杆状菌污染，高倍镜下分节现象。双抗很难抑制此种菌污染。建议你彻底排查污染源。

- z8 X' D  c2 q' t: J% w
好像挺像您说的杆状菌... 呵呵