程序降温冻存盒使用注意事项

hesu1105

实验室虽然有程序降温冻存盒，但怎么使用一直都搞不明白，我觉得是不是应该把程序降温冻存盒先从-80度移到室温放一段时间（细胞刚开始还没冻的时候就是室温），然后把细胞放进去，再一起移到-80度，这样才能实现程序降温呢？ 时间使用长了，感觉里面的液体是不是异丙醇啊，使用时间长了会不会挥发或变质什么的，要不要添加或维护一下呢，还有有一只降温盒因不小心给倾斜让液体流出了部分，要补充吗？

savid888

冻存盒外表面有刻度的吧，异丙醇液面要高于最底线。
* U7 I+ a/ u5 x$ h5 X. t冻存盒肯定是先放在室温，然后放进去细胞，置于-80，利用异丙醇实现梯度降温啊。+ G. L3 ?, l8 W3 F3 B
根据论坛里的讨论，异丙醇使用过一段时间后是要更换的，但是我一直没换过，也没发现很大问题。

开心果王

我们实验室冻存盒平时放4度，需要冻细胞时直接拿出来用就可以了。第二天转移至液氮，贵重的细胞尽快转移，不然会影响复苏成活率的。一般是用5次就更换一下异丙醇。现在也有一些商品化冻存液可以直接丢进-80的，很方便，效果也不错的。

漂泊的风

异丙醇的量是要保证的，不能低于表明的线，否则不能起到很好的程序性降温作用，我们是在4度放置，放了细胞后立马放到-80度冰箱，第二天再转移到液氮，效果很不错。

happyab

异丙醇熔点：-87.9度的色透明具有乙醇气味的可燃性有毒液体。注意了有可燃性！急性毒性：口服- 大鼠 LD50: 5840 毫克/ 公斤； 口服- 小鼠 LC50: 3600 毫克/ 公斤。刺激数据：眼睛- 兔子100 毫克/ ！请注意清理！

南宫燚岚

应该不可以把冻存盒放4°的，因为梯度降温的起始点是室温20°左右，所以从-80℃拿出来的冻存盒应该现在室温静置一段时间待其恢复到室温再使用。
; q3 g. H6 f; P2 i! p7 m而其中的异丙醇应使用6~7此后更换一次，而且保证液体量达到刻度线，否则降温效果会受到影响。

momocy

冻存盒里的异丙醇一般是250ml，低于刻度了要加上，理论上是5次以后更换异丙醇，但是异丙醇对环境有害，我们可以多用几次，只是少了的时候要加满。  b% j9 z8 H1 x1 G
还有冻存液里面的DMSO对细胞有毒性，尤其是室温的时候，所以冻存盒和冻存液先放4°，等把细胞用冻存液重悬好了放在冻存盒里，还放回4°，等到出细胞间的时候再拿到-80°里面保存。过夜再转入液氮。

花饶然

回复 开心果王 的帖子1 X$ W) f' w9 e0 Q& K9 @' p( M% ]
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请问，您说的商品化冻存液是什么，介意分享一下吗，冻存效果如何呢？

开心果王

是zenoaq的cellbanker！可以上网查一下！1 ?7 O3 |# k1 O4 p& c& b

zhaogy604

如果实验持续时间长我还是会把它放到4度冰箱的