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求CFSE标记MSCs体内示踪的具体方法 [复制链接]

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楼主
发表于 2012-1-14 21:27 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
求CFSE标记MSCs小鼠体内示踪的具体方法,特别是标记阶段,是先消化再标记呢,还是标记后再消化下来?多谢
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沙发
发表于 2012-1-15 15:42 |只看该作者
自己踩一下吧,一文献有描述,跟大家分享一下。  j+ k) `1 }3 h. W5 Z
  1、荧光染料CFSE 的准备:将荧光染料CFSE 1 mg,用360 μl 二甲基亚枫(DMSO)溶解,配成5 mmol/L的母液,于-20 ℃蔽光保存。标记前用无菌PBS 将母液稀释成所需浓度,要求现配现用。
0 F+ F% P! f+ w& Y- A; m   2、CFSE 标记MSCs 细胞:制作细胞悬液,加入等体积的CFSE工作液,于37 ℃温箱中振荡孵育10min,用40%体积的冷小牛血清终止标记10min.离心洗涤2次后用完全培养基重悬细胞。CFSE终浓度调整为5μmol/L.
) b* x7 e% Y0 e/ f请大家说说自己的经验,讨论讨论: T$ G9 K) b2 \, q+ Q  O
min
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小小研究员

藤椅
发表于 2012-1-16 08:29 |只看该作者
节前人少 耐心等待一下
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