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样脐带MSC大约有一年了,脐带总有个差不多几十了吧,谈谈一点心得:
: y! f! T; }5 |# M& Z n一直用贴壁法样脐带MSC没对比过酶消化法,不过总体上感觉贴壁法还是挺不错的,得到细胞的时间和质量大体上能算稳定。1 v7 O! Q1 [* j' S; u% O& C3 F
培养得到的脐带MSC的确是有好有坏,刨除操作等人为的原因,我个人认为脐带本身之间是有很大的差别的,不光是状态和生长速度及能传的代数,连流式结果都相差甚远。当然,技术好的人能比别人养的好,我曾经一个细胞培养到20多代,细胞状态仍然和原代形态差不多,但是大多数时候也就养到10代就状态不好了。
/ e# Y6 ~$ ^. Q7 Q8 \ o/ g还有就是养细胞一定不能太懒,不能等细胞长的十分满以后再传代,哪样很容易老化,也不能传代的时候为了省事传的很稀,哪样也不好,有人说应该前几代高密度,后面低密度。* |7 A0 L: c2 i, q
总之我的经验是不但方法要对,态度也要端正,要小心翼翼的伺候细胞,有时候感觉养这玩意比伺候爹娘和媳妇都费劲...................." C+ B0 n6 h( o" h& S, C) n( [
& Q+ S: g' L% J还有楼上说的培养基变黄很快,我感觉要么你是污染了,要么你就是培养基PH平衡系统不好。干细胞要是等到培养基变色了哪还怎么活啊!哪么娇贵的东西。 |
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