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胶原酶、accutase还是dispase?   [复制链接]

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楼主
发表于 2012-10-25 20:41 |显示全部帖子
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回复 sizhengliu 的帖子3 \7 u2 l: y: b: n& H1 k! N
$ Q8 n3 Z% j) ^; k- |
小鼠的iPS选择胰酶或者accutase消化,人的iPS选择胶原酶4或者dispase,dispase消化的效果最温和了。我一直在用accutase,这个酶消化完的细胞是小的细胞团块,3个细胞左右,非常适合小鼠干细胞高比例传代,37度作用2-3分钟,消化程度刚刚好。accutase和dispase,gibco都有成品,买回来分装后就可以直接用,非常方便。accutase大概800左右,dispase貌似要3000?我记不清楚了。
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沙发
发表于 2012-10-29 09:50 |显示全部帖子
回复 sizhengliu 的帖子
- _, n  L/ m8 P1 M* ~" D/ Y) Q3 n: n6 e7 h
用DMEM/F12 1:1 配置胶原酶4的工作液,工作浓度是1mg/ml。 配置的量看你养细胞的数量了,可以配置30ml的工作液,分装为1ml,与-20℃保存,每次解冻一只使用,这样消化的效果好。
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