请教大家个关于支原体的问题

tiduswang

本人现在怀疑细胞有支原体的污染，想请教大家如何检测，用什么试剂或者方法啊？如何处理细胞?谢谢

shashou_com

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国内基本不做支原体检测的。

scienese

现在国际上一般使用LONZA试剂盒检测支原体，效果很好。现在PCR方法也有很多种，也有很好使的。你的邮箱，可以细说。

xbs530515

可参见2010药典3部附录的支原体检查方法。目前用的最多的有3种方法，培养法、指示细胞法和PCR。但培养法时间太长，要21天。所以可考虑用PCR法，方便迅速，灵敏度高，缺点是有可能出现假阳性。H33258染色（指示细胞法）也较为灵敏，推荐使用。并不需要使用待检细胞，只需采用3天未换液的培养上清即可，详见药典。但需要用到VERO细胞进行检查。还有就是，如何怀疑有支原体污染,一般支原体污染是没有明显的变化，除非较为严重时，才会出现细胞状态不好的情况，建议先在细胞培养上找找原因，不一定是支原体污染造成的影响。

lazyworm

细胞支原体PCR检测试剂盒，我们实验室好像还没检测出过支原体污染，所以不知道这东西准不。

goodboy

回复 tiduswang 的帖子- v# e' t$ d8 z/ h* G, x

; s5 @) m% R) W/ r3 K) }9 Bhttp://www.stemcell8.cn/forum-vi ... D%CC%E5-page-2.html

luoziwei

直接染DAPI，如果细胞核清晰可见则没污染，如果在核的周围有模糊状，像丝絮状一样的，就是污染了。

tiduswang

有没有方法可以既能检测又不伤害的，因为只有那么几瓶的细胞，直接用33528浪费。支原体怎么可以去除？用抗生素?除去抗生素有其他办法麽?
# f; f9 W+ r- e- l9 M6 z

varing

有次听讲座 说日本的实验室80%以上都支原体污染
, o3 S& [' t' R3 l中国的实验室就... 根本没多少实验室定期检测支原体污染

SKC-SFC

可以的话，我可以提供PROTOCOL