如何分离脂肪干细胞和前脂肪细胞？

bigsnow55

请教各位，从小鼠取材，获得了基质血管成分(stromal vascular fractions, SVFs) 后，如何从SVFs中进一步分离出脂肪干细胞和前脂肪细胞呢？同时分离或者分别分离都可以。

meister

磁珠分选， 贴壁培养均可

bigsnow55

回复 meister 的帖子& K/ s2 y$ ?8 `/ \3 z: L! C/ O

: F) ]4 P: r4 Q. w( g谢谢！
5 ?7 E+ U% A3 I) d3 w; U, w请问贴壁培养具体如何操作，脂肪干细胞和前脂肪细胞的贴壁性能差别大吗？

meister

回复 bigsnow55 的帖子+ C; }# a. @1 q6 I: `' w

- }0 D, y% S( N8 ^9 y贴壁培养和常规细胞培养一致。) _# y, c6 b; a% ?
两者差别不大， 不能用此方法区别

danieldan08

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  V' V! u- H& e  _+ L" g1 r: k+ h5 `# m3 m
( @' Q$ @" d1 ]: W/ ~+ }% q那用什么分选呢，求知中

zerollx

" Y1 y) t: @: e. L& [, c) I

- W$ S0 i/ g; X6 d回复 danieldan08 的帖子  T" K$ Z! e: \! y1 M# A
: d  r3 y6 O* _" {9 Z8 `
查点相关资料吧，S-100和DLK蛋白是在前脂肪细胞中表达而在脂肪干中不表达，可以通过此表面抗原进行精确分选，不过一般用200目的纱布过滤后通过多次传代即可达到去除前脂肪细胞而只留下脂肪干细胞的目的，不过前三代尤其在原代传代时消化时一定要注意，只需消化2分钟即可，剩余的贴壁细胞不能要，那是杂细胞；其次是原代接种的细胞首次的换液时间，最好2h后就给其换液，减少杂细胞的贴壁，此时脂肪干已经充分贴壁。

六季

回复 zerollx 的帖子$ T+ P8 V" U) j. s

- v/ X6 Z6 t1 S2 y8 b, j  O: a不好意思，在下是新人，关于S-100和DLK蛋白是在前脂肪细胞中表达而在脂肪干中不表达，可不可以给篇文献学习一下？谢谢版主了！

细胞海洋

回复 六季 的帖子) q' s, N! O8 S$ `7 L( b" H

, i1 g) n! m/ Y9 X建议你发新帖提问

zerollx

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* ~2 B! Y6 ]9 q: R# i
8 M+ G$ L5 K( ^; ]* C3 ^S100的工作你搜一下国内西北农林屈长青老师的文章（附件），以其为源头跟踪引文吧，DLK的文章记得在PLOS one上发过一篇，手上没文章，你检索一下吧，但是S-100有很多家族蛋白，以前也染过，特异性不好，这个指标不建议使用！

六季

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6 y' S# i' }9 G/ d" R- C% t谢谢版主~