定量的问题

huangcong1988

最近做了一次定量，结果还不错，就是所得到的曲线看着有点不舒服。扩增曲线不是很平滑，这个有影响么？6 n1 x, b1 \" n
5 |9 U  ]1 b% }
补充内容 (2012-2-17 14:52):
+ p8 l: c1 B; T( p; n, ?6 h还有一个问题，就是做绝对定量，横坐标应该是用Cp值还是Ct值，它们有什么区别呢？

huangcong1988

这个是那个扩增曲线

Jwian

荧光值好低，说明模板量比较少或者荧光染料不太够。
& _5 c7 O+ _$ P; N" a/ s1 Y请问你基因的表达量怎么样？! |/ l: w: ~" }2 r" g
另外你用的多大的反应体系？用的哪家公司的试剂盒？

huangcong1988

回复 Jwian 的帖子1 K: B+ {4 J7 n: H3 ^7 U
" G3 `" K) R" O+ I
我这个是做标准曲线的，浓度不高的，因为待测的样品浓度也不高，而且定量的时候cDNA浓度不是要求很高吧？主要是这个曲线是不是有很多锯齿状的，是不是说明染料降解了，或者说这个效果不太好，TOYOBO的染料，roche的定量仪器，反应体系为20μl