脐带间充质细胞贴壁法出芽率怎么这么低？？

shizhu198511

脐带间充质细胞贴壁法为什么一个皿里有的组织块可以长出来MSC，有的长不出来，有时大皿能长出来，有时小皿能长出来，究竟什么原因，同样的环境下，我的10块组织可能有1块长出来，前辈做的出芽率多高呀？究竟什么原因？？、

雁南飞

相当地低，检讨一下培养体系。

shizhu198511

雁南飞 发表于 2012-2-21 11:50
, k+ D9 h8 u  f5 o& d0 `5 }6 g相当地低，检讨一下培养体系。

, ?" d5 k- B$ P# S1 D/ t; p
我的是α-MEM+GIBCo胎牛血清10%的，难道血清浓度太低了，没加什么因子

sanfa

你几天看的  多等几天 别着急 有时候爬的比较慢

liluli0715

我们用的培养体系跟你一样，大多数组织都能迁出细胞，你的之所以迁出少，跟你组织块的大小有关，一般来说组织块越小越容易迁出细胞，此外与组织块贴壁牢程度也有关

雁南飞

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5 R/ r, f, Z  D; X" O$ g; S/ m2 t/ Z; M( \* J& Q4 ]$ S
加点EGF和FGF试试

leungyk

我也不是每塊組織都有細胞爬出來，大約只有1/3成功  b/ Q. O% J4 R+ l  l

! p4 x9 K8 Q/ T3 ~另外，我看過一份研究是沒有把組織切成小塊，只打開臍帶拿走血管就成段的去培養，最近試試用大約1cm平方的組織去培養，成功率很高呀！
( f$ n& D8 Y: }我用的是DMEM/F12+10%FBS

shizhu198511

leungyk 发表于 2012-2-24 11:25 0 O+ ?! u: z4 a$ Q0 q
我也不是每塊組織都有細胞爬出來，大約只有1/3成功
9 k! A5 i1 Q0 N: N4 w/ U
2 X% k. K: a! P6 b. F另外，我看過一份研究是沒有把組織切成小塊，只打開臍 ...

! f3 k3 a6 p$ W6 w- P3 v, H
请问你是怎么把组织块切成1cm2的，谢谢！

雁南飞

去除血管后剪成碎块似乎更好一点啊，米粒大小就可以了。

brian111

我们之前用的那种弯头的小剪刀，把华通氏胶剪成尽量小的块，越小越好，但是时间不要太长，也不能让胶干了。可我觉得最重要的还是培养基，培养基好的话，有的时候就算减得比较大，也能爬出来，基本上没有爬不出来的！可是我们用的是商品培养基，这点上帮不了你