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本帖最后由 holywater 于 2012-3-5 23:21 编辑 ' a) u# N( e+ ]0 l: `, _
2 u9 E: l5 G6 P+ m其实这个取决于你要杂哪种蛋白。我用的是RIPA裂解液
+ L& N6 W) q. F
; [: [( Q7 c0 f2 y/ jRIPA裂解液有三种:强,中,弱。2 r' N q1 ]6 x
: r0 O& h8 P; f, ]1 T1 Z9 w
如果你提取的是细胞内独立的,结合力差的小分子蛋白,那么在细胞上打个孔使其出来就好/ @/ K t1 Z6 m4 U& ^' o6 ^: t; k
没必要完全裂解细胞,这时候用弱的裂解液还能减轻本底
# ^* o$ p4 R9 A k
3 z; S0 f# Y' P如果你提取的是跨膜紧密结合的蛋白,那么要用强裂解液来完全崩解细胞结构,从而释放蛋白
' \; | L8 p) S+ c$ R; t9 h
, E5 x. m6 X3 M6 M, v" Q在二者之间的用中度裂解液
- P: e9 p9 \$ F
! m6 A2 z* j8 Y7 H# }8 JRIPA的强裂解液成分有triton-x100 ,中度裂解液为NP40,弱裂解液为低浓度NP40
# ^: g5 j# g' o3 Q4 `% A1 G6 w: J1 z* \' P( Y- W
& h, R' A* ~0 l- n( Q0 N7 n, Q
建议想清楚再选择,不要照抄隔壁实验室。 |
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