急求神经球荧光方案

changbo529

神经干细胞贴壁培养后72小时视野中出现如图细胞，请问这是少突
) T( B7 b/ T& Q$ r! v  F$ H胶质细胞吗？还有一个问题就是悬浮培养的神经球怎样做免疫荧光和计数？急求

changbo529

回复 changbo529 的帖子- U/ E( F3 U. Y+ [& H! [
& a. D; F4 |- g( z. N" Z6 l" y+ k
该图是少突胶质细胞吗？

aifei001

请教楼主，神经干细胞怎样贴壁培养？换培养基还是换别的条件，我们想让神经干细胞贴壁，总也不贴。谢谢

changbo529

我用的是多聚赖氨酸包被，但一贴就分化，但我又不想让它分化，所以我现在也很无语

changbo529

回复 aifei001 的帖子
/ {; |3 C; b2 n! b: v6 x8 C5 s' k  ]3 m
我用的是多聚赖氨酸包被，但一贴就分化，但我又不想让它分化，所以我现在也很无语

aifei001

回复 changbo529 的帖子
1 f- R" d3 m$ L( Y4 x/ o: m5 A1 Q- ^) g, q+ d2 f
谢谢。我也一样无语啊，看来还是文献看的少。希望问题都能克服！

jessewill

回复 aifei001 的帖子& K: A+ p" Z, j$ z8 h
  |" ^: O% D3 D) ~* O) a
我觉得是你的细胞状态不行了吧，也就是说你悬浮培养的神经球已经出现了一定的分化，因此贴壁之后，你就很快看到了神经干细胞的分化。# v+ z, g: A: q8 [
如果保持着多能型的干细胞，即使贴壁也是不会分化的。8 E  {- M3 r+ D# d$ z- C4 n, D
所以还是从培养NSC的条件上去考虑。

jessewill

回复 changbo529 的帖子
+ u2 P/ i3 _% c8 c, M
4 p+ b  [; o* E, s2 `我觉得是你的细胞状态不行了吧，也就是说你悬浮培养的神经球已经出现了一定的分化，因此贴壁之后，你就很快看到了神经干细胞的分化。
2 J, j1 W* h5 Q5 P4 y' c; _$ X- `6 `如果保持着多能型的干细胞，即使贴壁也是不会分化的。
8 J9 G4 i4 a" h4 z; a7 C/ }" Z所以还是从培养NSC的条件上去考虑。

jojomayer

jessewill 发表于 2012-3-26 18:00 ! r# w* h; Q! b& ?
回复 aifei001 的帖子
7 z0 {9 L( I3 `' I
( y, l9 I! G6 o我觉得是你的细胞状态不行了吧，也就是说你悬浮培养的神经球已经出现了一定的分化， ...

  E( C( ~0 a( k& W
请问一下你是如何通过镜下观察判断细胞有没有分化的？8 t3 k" L; ~; F/ H3 ^
楼主图中的细胞是什么细胞？如果细胞没有分化，镜下应该是什么样子？与分化的有什么不同？3 ?% ~# z! r7 Z
谢谢！

justin03

感觉楼主的图不是神经干细胞了，悬浮培养神经干细胞一般会成球的，贴壁培养的话也会成球的，细胞有短突触，不会像图片那么明显的突起的。会不会是取材或传代的过程中有接触到FBS，让细胞分化了？