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关于可调控表达的慢病毒包装系统 [复制链接]

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楼主
发表于 2012-5-24 00:23 |显示全部帖子
本帖最后由 细胞海洋 于 2012-5-24 10:51 编辑
+ z& {' {/ N$ ]5 H0 q7 f5 _0 {- z# ~: Q+ P% g' X  i
根据我们公司的系统,分别构建两个质粒:EF1A-rtTA-IRES-报告基因;Tre-目的基因-IRES-报告基因。先用rtTA的质粒转细胞获得稳转细胞株后,再用Tre质粒包装成慢病毒转染rtTA细胞株。希望对您有用。
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沙发
发表于 2012-11-29 11:40 |显示全部帖子
回复 小木梅 的帖子# [4 H& Q4 E. `/ o; A9 d7 M

( b+ d; N9 g) t诱导型表达是指在诱导型启动子的驱动下,例如TRE,需要rtTA 这样的转录激活因子和doxycycline 药物的存在下,才能表达下游的基因。
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藤椅
发表于 2013-5-28 08:30 |显示全部帖子
回复 Morpheus 的帖子; ]2 E2 M8 k/ c* a
2 E; H6 ~7 e/ U; h, ]6 g
非常抱歉,有一段时间没有登录论坛了。如若构建两个质粒,一般都需要分别添加Puro和Neo抗性的。构建Mrt稳转细胞系的质粒简易图谱为:Tre-Mrt-PGK-Puro和Promotor(EF1A)-rtTA-PGK-Neo。如若有不明白的地方,请随时联系或者咱内短信我。
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