干细胞培养中添加因子的作用

daxi-fighting@1

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2 h4 n) _" S1 q4 S7 E0 [# p4 V: t. O, c! f# C! B: l
你好，那我想问，我再养人的牙根尖乳头干细胞。Root apical papilla was gently separated from the surface of the root, minced and digested in- a+ H" F4 M: J7 W
a solution of 3 mg/ml collagenase type I (Worthington Biochemicals Corp., Freehold, NJ) and
, r3 O/ L8 u/ \/ z" U4 s% b4 mg/ml dispase (Roche Diagnostic/Boehringer Mannheim Corp., Indianapolis, IN) for 30
, D; g: Y0 b0 \$ G; rminutes at 37°C. Single cell suspensions of SCAP were obtained by passing through a 70 μm
9 P5 K* ]: p* F" d0 xstrainer (Falcon, BD Labware, Franklin Lakes, NJ), seeded at 1×104 into 10-cm culture dishes
/ Q9 r0 S" }- T4 f3 ^' s, i" h4 m(Costar, Cambridge, MA), and cultured with α-Modification of Eagle’s Medium (GIBCO/  N4 |& N% `; {
Invitrogen, Carlsbad, CA) supplemented with 15–20% fetal bovine serum (FBS) (Equitech-
5 V  r. B6 K/ y  BBio Inc., Kerrville, TX), 100 mM L-ascorbic acid 2-phosphate (WAKO, Tokyo, Japan), 2 mM
, A' B7 C% k6 d+ Y/ A% g3 @L-glutamine (Biosource/Invitrogen), 100 U/ml penicillin and 100 mg/ml streptomycin at 37°9 L2 n% [( Z! S) @; j
C in 5% CO2. 这是我要养的这个间充质干细胞的培养方法，我想问的是：1：a-MEM和DMEM的区别，当然除了成分上的区别，是不是一个促进细胞的分化？有的人养牙髓干细胞会用GIBCO DMEM/F12(1:1) 11330，有的用hyclone的SH30265.01B。2:100 mM L-ascorbic acid 2-phosphate 这个L-抗坏血酸2-磷酸酯的具体的作用是什么呢？提供vc的营养，只是比vc稳定？可是矿化诱导液里面是加了抗坏血酸的，这不是促进干细胞的分化嘛？3：我按照文献里，查到http://www.wako-chem.co.jp/english/labchem/productinf.htm 这个公司的产品只能查到L-Ascorbic Acid Phosphate Mg Salt.nH2O。sigam公司也只能查到A8960 SIGMA  L-Ascorbic acid 2-phosphate sesquimagnesium salt hydrate 。我到底该怎么办呢？这个细胞的培养 我到底该选择什么样的培养基，这个L-抗坏血酸2-磷酸酯 我该怎么买呢？麻烦您了。

jessewill

回复 fanmihu1987 的帖子# E0 |$ z% ?7 {1 M# z) p- K6 q

' g  f9 W- t8 w) \% S6 g& xLIF维持干性啊，2-ME是抗氧化剂，L-GULUTAMINE可以维持细胞活性的

xiefenghe

看看日本人怎么做的不就知道了吗