求小鼠12.5dpc雄性生殖脊消化成单细胞，多少能达到10^8？

chenchunlei

   同题，谢谢

hcluo

请教一下楼主，生殖脊细胞是如何取出来了的啊，需要如何饲养？谢了！

chenchunlei

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( t' r& {1 k; W7 D' H7 \) B# C8 ]9 F' ~3 N5 w
不好意思我没培养过生殖脊

yangpan521

1.首先，从见栓那天开始计时为0.5d,12d后取孕鼠颈椎处死后，剖开腹腔 取出胎儿（一连串的）放在培养皿内 。- ?$ @! J/ u" F9 m' `! V  n
2.在超净胎内用75%的酒精浸泡1min,然后用生理盐水清洗干净。
2 t5 Q% [: @, ^. \9 m* h; S7 h3.用无菌的镊子慢慢剥去胎膜、胎盘等暴露出完整的胎儿。
# E% D/ p9 \: S! N6 u/ n1 i7 D4.取一新的培养皿，放入生理盐水或者DPBS（含双抗），将胎儿放置其中。
3 I5 l; _- D0 V6 i7 D7 B5.在体视镜下，用两个油丝镊轻轻分离生殖脊，胎儿很脆、已破碎实验应很小心，胎儿的腹部有点红色（为内脏），找到肾脏，紧挨着的就是生殖脊，- V0 {4 a' Z7 E) f; X3 l
12.5d的胎儿生殖脊彼此挨得很近，呈长条状，雄性外观可见里面呈条纹状。
1 W/ @0 E: [: T, I* v: j- \本人的实验，仅供参考。

xiangchou812

yangpan521 发表于 2012-4-6 09:22 ( I% ~; @/ ]5 q  B/ ^8 P, b
1.首先，从见栓那天开始计时为0.5d,12d后取孕鼠颈椎处死后，剖开腹腔 取出胎儿（一连串的）放在培养皿内 。 ...

- ^$ G# m* j: d) x( _( A: `$ R
。赞一个！！！！

hcluo

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. T, \! R, ^# E$ v9 W5 P7 N6 W3 ]4 k  a( l; [/ L
谢了啊，生殖脊与肾脏有颜色区别吗？有图吗？

yangpan521

今晚我传上照片给你看看吧

chenchunlei

回复 hcluo 的帖子9 c& j0 O2 p4 o2 W7 u% r/ r  Q

9 X1 _0 p$ v) m3 I' _小鼠胚胎操作手册上有

hcluo

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4 ~# y. ~8 \. d( S+ G2 E* p3 _/ K+ s9 j好的，谢了

yangpan521

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" O4 L# v# d# e, a1 c- w- Z今天实验室的电脑出了点问题，图片没考出来，明天我再试试，不好意思了