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诱导实验中培养基中是否要添加血清 [复制链接]

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楼主
发表于 2012-4-11 10:45 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
看了中药诱导BMSCs向神经细胞分化的多篇文献,其中2/3的实验使用无血清培养基加药物进行诱导,1/3的使用有血清的完全培养基加药物进行诱导,做出来的实验结果差不多,那么,是否用血清该从哪些方面考虑,血清可能诱导分化?影响分化效果?一味的促进增殖?
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金话筒 优秀会员

沙发
发表于 2012-4-11 11:31 |只看该作者
我也想过血清对干细胞的影响,血清中有些什么东西呢?蛋白质和生长因子、矿物质、维生素吧,除开生长因子考虑,其他的是细胞基本营养物质,是细胞生存的很好,我试过不加血清消化4度过夜,细胞大多死了,只有培养基是不够的。生长因子问题就复杂了,含的成分和含量每瓶都不一样,小牛的对于小鼠的或者人源的干细胞有作用么?含量都不一样,怎么个比法?所以有的实验特定生长因子和血清效果差不多,那么可能血清只是提供更多营养物质而已,血清里复杂因素起的诱导分化效果不是很大吧?0 K% U6 G( a1 ?. ^8 ?
欢迎大家来讨论,甚至该做点小的对比试验。
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藤椅
发表于 2012-4-11 12:17 |只看该作者
回复 evial 的帖子$ D; a3 T. z9 c# A# [
0 b# v  U4 }; F/ I8 A( W$ q
用药的各组只有培养基加药物,细胞部分死亡但仍然有一部分存活且分化,说明药物在诱导分化的同时还有维持细胞存活的作用??
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金话筒 优秀会员

板凳
发表于 2012-4-11 13:06 |只看该作者
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那要看死了多少细胞,用的是什么药物啊
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报纸
发表于 2012-4-12 00:00 |只看该作者
血清中含有蛋白质、氨基酸、葡萄糖、激素等,其中蛋白质主要为白蛋白和球蛋白。氨基酸有多种,是细胞合成蛋白质的基本成分,其中有些氨基酸动物细胞本身不能合成(称为必需氨基酸),必须由培养液提供。血清激素有胰岛素、生长激素等及多种生长因子(如表皮生长因子、成纤维细胞生长因子、类胰岛素生长因子等);血清还含有多种未知的促细胞生长因子、促贴附因子及其他活性物质,能促进细胞的生长、增殖和贴附。因此,细胞培养时,要保证细胞能够顺利生长和增殖,一般需添加10%~20%的血清,动物血清还可起到酸碱度缓冲液的作用.9 c- R( `8 w& _/ J! L2 o" y
) B* }6 c8 i/ t8 t/ y3 o8 L
另一方面,正是由于血清中含有多种未知的促细胞生长因子、促贴附因子及其他活性物质,这样就有可能使实验结果受到实验因素以外的未知影响,所以有些实验会选择无血清培养基。
+ J0 K6 y7 ]+ T- u8 T
. x5 j/ q! I8 F0 q此外还要考虑细胞在两种培养基中的生长情况吧,毕竟获得实验结果的前提是是细胞能够良好的生长。
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地板
发表于 2012-11-4 10:20 |只看该作者
回复 李1二 的帖子1 q0 P/ r  S3 M/ p

& P% A3 ?* M+ `7 J# I8 V那空白对照组,是什么都不加还是加什么物质?这个问题我想了很久,没想清楚。
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