讨论下大鼠MSC培养，大家来看看。

如来的观音

采取全骨髓贴壁法培养SD大鼠（4-6周龄）原代MSC，10%FBS+DMEM，3天时全量换液，待80%密度传代。

如来的观音

为什么到了第4代全变成了煎鸡蛋状的，是老化吗？但是看其形态还是比较均一的，且对胰酶消化非常敏感。搞不懂？

飞翔的十字架

以我养大鼠MSC的经验，P1的细胞其实状态就不太好了，细胞逐渐失去立体感，铺展过大/ E2 l) ^/ [$ N9 s0 Q1 @' I

seall

分化了吗？

如来的观音

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# o! H6 R8 W( I. r: p3 }+ w: I# E" @& U( ]( ?
我想没有分化吧，这才第4代呢，就像“飞翔的十字架”说的P1代状态就不好，总不至于P1就开始分化吧，再说还能自行分化得形态如此均一。莫非这个时候应该流失鉴定？

如来的观音

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  p$ z* Y: V. c' V' W$ }, H! S1 g3 H! _- ~! @  T' j: H
我们实验室的大鼠都是这样的，而兔子的就不是，培养条件都类似。难道是血清问题，请问你们用什么品牌的血清？胰酶浓度及消化时间呢？我用康宁T25养的，您的呢？不吝赐教！

evial

有的看着像是成纤维细胞。血清里面有生长因子会让细胞分化，应该用专门的干细胞培养基吧

evial

有的看着像是成纤维细胞。血清里面有生长因子会让细胞分化，应该用专门的干细胞培养基吧

天枰2012

4代像是老化了，不知道你传代的间隔时候是多少？有没有加生长因子？

不苦的药

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9 J: C6 O. l1 r3 G1 q7 s2 G: G( j我们实验室有养的用的GIBCO的血清