关于AKP染色的问题

开心果王

2012-4-15 23:19 上传

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2012-4-15 23:18 上传

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请教各位，为啥我的AKP染色不像以前那样是红色的了啊（请看图）！我用的是sigma公司的kit。是用fast blue RR salt（胶囊形式配制而成）：Naphthol AS-MX phosphate=24：1配制的，每次现配现用，染色30min。最近我新买了fast blue RR salt（以前的那瓶找不到了），结果用它配成的染色液对hiPS染色，结果都是淡蓝色（如下图），从前染色都是那种红色的（跟大多数文献报道一样的），不知道是什么地方出现问题了，请各位战友帮忙分析分析问题啊，多谢了！

tjbone

过去你用的试剂盒是监牢红fast red  salt 而不是 fast blue RR salt，如果用fast blue RR salt则需要用中性红染细胞核才好。

开心果王

回复 tjbone 的帖子* @' F& z! C+ j$ X2 l" l

3 B9 E: V! E# ]  X2 T! n多谢tjbone了。请问用fast blue 就是这种颜色的吗！我也有见过那种AKP是深蓝色的，但是相较于我上面的颜色要深很多，我这个染色感觉很弱，就像是阴性的了！不知道什么方法可以使他变深一些啊！？

tjbone

注意你染色的PH值，要求在9.2——9.4

开心果王

多谢楼上的指点。我刚又查了一下之前的记录，发现以前也是用的fast blue 啊。这次新买的胶囊配出来的溶液也呈黄绿色的，以前应该是无色的。还有就是Naphthol AS-MX phosphate上面标注的失效日期是2010.10 。但是本人去年也用过它，没发现问题啊！会不会是这个东东过期了啊！

开心果王

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4 i, O: V1 N0 n* J/ ]1 o+ u+ ?! ]1 m' ]) n! k& H, a( `$ v+ `
实在是抱歉，我找到了之前买的kit的货号了，确实是fast red violet ，所以用新买的fast blue就是蓝色了。但是颜色太浅了啊，不知道能否说明AKP阳性啊！