角膜缘干细胞一点理解+几篇好文献

yuhaoze

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刚进入这个领域不久，不知道自己说的对不对，还请前辈们多多指教啊：0 ^# l" o' v* w) G/ x9 c8 B
感觉近几年角膜缘干细胞的研究没有太大的进展
7 v0 e5 ]9 [% D4 ?; b在临床应用方面，一些病例报道的内容十分相似，用移植物（载体/载体+细胞）治愈部分或完全角膜缘缺损，载体大多用去上皮羊膜，也有用一些新物质来变着花发文章的，现在好像有人开始用角蛋白了；细胞方面，体外扩增的角膜缘干细胞还是主流，同体的也有，异体的也有，其他的包括口腔黏膜上皮细胞，发根毛囊细胞，还有用结膜上皮来做替代的（个人感觉有点怪异），不知道下一种细胞是什么。移植上的细胞（非角膜干）到底能不能活，能活多久，大多用DNA多态性、RNA genotyping等方法来检测，大部分人还是说移上去的细胞最终会消失，有人发现最多的能存活两年半。另有人用sex-mismatch的方法，通过FISH检测Y染色体来区分自体上皮细胞和移植上去的上皮，很有意思。但为什么活，为什么消失，现在的解释是免疫抑制，传统认为的免疫赦免区域其实也是存在骨髓来源细胞的，多少存在点儿免疫排斥。1 q% S! @2 G7 ]: D" _2 m
理论研究方面，角膜干的特异性分子还是没找到，现有的主流用来区分角膜干、结膜上皮和角膜上皮的蛋白包括CK系列、ABCG2、P63等等，但大部分研究仅限于正常生理情况下，对于各种病理情况下的这些蛋白的表达还没有明确统一，各说各话（长了血管儿的角膜样子好恶心）；角膜干存在位置以及XYZ理论好像根深蒂固深入人心了，不可动摇了，不过08年的一篇nature让人眼前一亮，说整个眼表都存在寡能干细胞（oligopotent stem cell），角膜上皮细胞能培养出杯状细胞，结膜上皮细胞能培养出角膜上皮，角膜缘就更不用说了，实验做得没话说，对传统观念是巨大挑战，现在用他的理论在回头看一些病例报道，好像能找到一些支撑，但是并不多，用12年的一篇综述中的一句话说就是“实验结果仅限于老鼠，在人身上还不知道什么情况”。这种缺乏足够支撑的非主流好文章引来了一片骂声，最难听的当属10年nature上的一片评论，言辞相当刻薄犀利，看完了不自然地打了个寒颤，要是我这样被人劈头盖脸批一顿，一头撞死了，附件里面有，第二页是辩解，感觉底气不足。谁知道呢，开创性的工作往往是以这样的形式被人们认识的；再就是查明了角膜上不长血管是因为角膜上皮细胞分泌一种可溶性的VEGF-A受体，来中和血管内皮生长因子。2 \$ j9 d. e$ \5 k: W3 n
以后的研究何去何从啊，我也不知道，最近有一个研二的搞人类学考古学的学长发了篇第一作者SCIENCE，羡慕不已啊，都是学生物的，怎么差距那么大呢，嘻嘻。大家晚安咯

susuloveq

怎么回事？下不了哦
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yuhaoze

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7 e$ t0 C/ s1 r
+ m& A2 I1 c" r  n" H: W7 a, k5 O0 R给我邮箱，发给你

susuloveq

已下载，谢谢啦，近期要学视网膜的前体细胞提取，你有角膜提取的方案吗？

yuhaoze

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/ s/ y0 }) D% v. R) {5 N5 k
$ Z" ~. o0 F9 {" n+ Z! w! a0 {我实验室有个以前在第四军医大做视网膜研究的，可以帮你介绍介绍，不知道你说的角膜提取是提取啥呀

susuloveq

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3 V- E0 S6 I9 `  c7 m5 ^5 d
; k2 s% Y3 Y6 Z0 m+ e- B" W/ I6 G( {是吗？谢谢，都是提干细胞，视网膜干细胞和角膜干细胞，现在在找比较成熟的原代提取方案

susuloveq

是吗？谢谢，都是提干细胞，视网膜干细胞和角膜干细胞，现在在找比较成熟的原代提取方案

yuhaoze

角膜缘干细胞，主要是防止基质细胞污染，我想到的两种方法! Z% j6 o( @3 z7 R4 S  \) W
1、把角膜减下来，上皮朝下贴在培养空中，24h后揭下来，就会有很多上皮细胞留在空里面，有可能会增殖。3 {7 z- H) b! s; r8 }
2、用板层到把角膜缘抠下来，消化完了或者是不消化直接把组织块儿放在MEF饲养层上培养，以后都用饲养层
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