ESC分化为心肌细胞的方法

yumeixing

请教各位大侠ESC分化为心肌细胞的方法。

zpzp0312

先悬浮培养获得EB
( C7 E6 P- F# E& r9 n/ h5 A转移到明胶包被的培养皿2 }0 l: X8 G  ~) d9 d8 |
直接用DMEM+血清就可以
* |% X  z2 B1 J1 X; h2周就能看到心肌样搏动

cochongg

1状态好的ES
1 ~3 @! _- D/ @9 F# M) n1 J$ v2早上换液
+ c  R2 L. k; I* n) O/ [% Z8 |9 X3四小时后消化
* K6 W& N5 }  e4重悬后转到培养皿上8 |/ _9 Z% Y) N7 U
5六十到一百二十分钟沉淀
' i2 L/ e6 Q" k6 D6收集悬浮细胞
- r* U) E8 }% m) ~$ [9 e, }1 h- r7重复5、6
6 C% t, z0 I. r$ t+ q+ S# L3 r$ M: D8接到普通不帖壁培养皿中
; g  o7 Q+ c* _, P; M9第二天换液（小心换，细胞没贴壁的）
9 T- o% ~8 U- Y$ n' N# S6 P& i! C10两天后吸出囊胚
) ?; [4 q  z3 @9 Z" R& E0 U% A9 a11接到明胶预先包被的贴壁培养皿中, K7 J, r5 r+ }2 \! s3 p
12三天到五天换一次液7 k' ?8 k2 g+ z9 Q
13不要天天镜检，多看无益
% r/ {+ W5 Y2 J0 Z5 J14两周时间内细胞就跳了
* `( |! f4 c8 |6 T) y( F
8 y$ _0 a6 E; Q4 ?6 k注意：培养基一直用无LIF的普通高糖就ok了，血清加15%吧，
) V6 z& `' l5 |长得快

cherrysung

学习了

yumeixing

谢谢了，正在实验中。
* [0 e2 f2 D; c, W- H

yumeixing

请问铺明胶的作用是什么？
# M4 A1 l0 _/ a8 ]+ x* ?: P, B

王乾

请问有没有具体的文献资料？

cochongg

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! N( ?& p2 I+ G
" X: c# ^) p. l- a6 F1 U4 s/ `让EB贴到板上，其实就是提供附着点（相当于模仿子宫壁），换液的时候不容易吹起，

cochongg

回复 王乾 的帖子. N$ ~4 X  M$ T5 _4 V

3 S1 m2 g) ^- Y& f7 ]5 Z你要找2008年之后的文献才有，以前的没人做吧。: w5 h1 O! L& Q- r$ w1 Y0 T! z
我也没看过文献，偶然听说这个实验，就试着做，，都失败好几次，，，  p( c  V  I. [
细胞状态很关键

细胞海洋

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1 \" ?1 a* L% C6 x9 X$ f9 f# L3 t; P0 L) y9 D1 H# m
你询问谁 就点击对方回复贴中的回复按钮 然后输入内容 像我这样+ q" w3 R2 _( [% b7 H7 Q

5 Z' e) b8 D. a; |, |, O3 `& V否则他很难看到你的提问