两性霉素B在提取原代中的用法用量

相宜

本人在提取原代的时候总是碰到霉菌污染，先想用两性霉素B控制一下，请问各位大侠在开始清洗的时候（提取人的抽脂）用不用加，什么时候加？量用多少？

evial

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3 M& Q6 p8 x' G- P* X人的脂肪在吸取时是无菌操作的，脂肪在体内也是无菌的，不可能污染，是吸出来后后期操作带进去操作。不需要放这种抗菌药，这会影响细胞生长。

相宜

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+ j* i0 \7 G+ K. L
, G$ P6 l6 `6 H' `) S( l; i1 a4 c请问那些操作步骤容易导致真菌感染呢？我自己真是不知道那个环节出问题了，实验进行了三次总是这样，请高人指点

evial

就是常规养细胞的无菌操作啊！给你送脂肪时医生用的容器是否是无菌的？

相宜

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! s  e# z( e8 M+ @# J
; X. a5 t3 e! Q- O2 `就是 每次抽之前先用20ml的无菌注射器先给我抽的，盖上上面的帽后无菌包布包裹2层送到实验室，不出楼，上下层。这样操作有问题吗？

evial

这个操作看着是无菌的。你是不是放了很多抗生素？在人体抗生素用多了会引起二重感染就是长霉菌。你再看看使用的其他试剂有没有问题，培养基、PBS等。消化酶有的不是无菌的，要过滤一下再用，不知你家用的是怎么样的，会不会是这个污染了？

evial

我养原代肠癌细胞，现在消化时都不加抗生素，以前是加的，现在也没有污染啊！嘿嘿

avbn

回复 相宜 的帖子6 U  x0 |& m$ Q+ m' c$ w
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污染的事情不好说，需要排查每一个可能的环节，尽量小心操作。或者是因为环境的问题，考虑作一下彻底的清洁。