在饲养层上培养了5天的囊胚是不是不正常？

我不是小龙虾

这是我在小鼠饲养层上培养了5天的囊胚，在培养基里加了lif。但是里面有好多大空泡。这是不是干细胞分化了？还有其中间比较黑的那部分是不是干细胞？我用的饲养层是P53基因敲除小鼠做的饲养层，是不是干细胞培养只能在特定的饲养层比如说CF1上才能长出来呢？

zpzp0312

饲养层不是问题，胚胎也不是问题4 T* a" |. }0 P3 g8 o7 H5 H
有可能是胚胎来源品系的问题！1 F& l4 }2 C# K2 j$ q7 K" b
胚胎是什么品系？. z- m* Q4 Z, S3 F! K
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我不是小龙虾

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这个是我们实验室野生型的，是我自己养到囊胚而且也孵化出来了。。。等完全孵化出来后我种到饲养层上，就变成这样了

zpzp0312

回复 我不是小龙虾 的帖子7 ]6 Z6 x* r  G
1 {" P7 P4 b) P: Q1 }3 B" m
野生型也应该有品系吧？！
9 @$ t8 m# v) v0 L" Z3 y3 Z/ L' U什么品系？* \; g  L' w7 B: p0 ~( ?
另外你可以看第三张图，内细胞团会在囊胚扩展后形成一个突起于表面的团块！, y3 W7 \- c% K/ P- `! p
真正的ES是在这里的; o5 O  T# _$ o; {. e3 R
你可以看你的图片，内细胞团没有发生有力的增殖！

我不是小龙虾

回复 zpzp0312 的帖子: k) j. w: o4 p/ X2 ?
9 \+ x+ F8 e; \. R7 c2 ?2 h
恩，这个还真的野生型的，是我们从农户那里收集来的类似于松鼠的动物。。。目前还没有人做它的胚胎干细胞，我在摸索条件呢，干细胞没有发生有力增值。可能是缺干细胞生长因子了。。。谢谢啦

scienese

你的第一张图里那个黑色的团团是潜在的干细胞，是要把它挑出来的，其他是滋养层细胞。我也是做这个的，咋俩可以交流一下QQ号345244428，如果有意请在添加信息时注明来自干细胞之家
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我不是小龙虾

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* ~  R. g. g8 v/ h/ Q% L2 {" h+ s
4 ?$ F4 s$ o- J6 l好的。。。谢谢

zpzp0312

scienese 发表于 2012-5-30 22:09
" S. B) Q' i- V你的第一张图里那个黑色的团团是潜在的干细胞，是要把它挑出来的，其他是滋养层细胞。我也是做这个的，咋俩 ...

3 z/ y8 E4 v. c4 E' E这个“黑色的团团”已经丧失多能性了，甚至不备增殖能力* b( L/ n3 j* ]" R7 j, k5 H, N: n+ y
建议重新做，不要在这批囊胚上花功夫了！+ ]6 A: J8 x2 @0 D' M
我培养过用于分离干细胞的囊胚很多，这个建议完全是经验之谈

我不是小龙虾

回复 zpzp0312 的帖子* b1 L  m, V, p$ K: U( ^3 n

5 l2 |" H! c/ l恩。。。我已经扔了，准备重新做一批呢。。谢谢啦

我不是小龙虾

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" ~% V  Y1 C) f
9 s. a, c8 S3 A我想问一下，您有没有胚胎刚着床于饲养层一天的图片？其外面有没有滋养层？如果有的话滋养细胞是多还是少？