干细胞之家 - 中国干细胞行业门户第一站

标题: 培养CIK，添加IFN-r与IL-2和CD3的时间差问题 [打印本页]

作者: meixue1130 时间: 2012-5-26 01:52 标题: 培养CIK，添加IFN-r与IL-2和CD3的时间差问题

求教各位有经验的前辈+ s% Z- T+ F: ^+ [3 E
我看论坛上说，培养CIK时，IL-2和CD3要在IFN-r诱导24小时后添加才好，而且一定要超过24小时，那少于24小时有那些不好呢？？细胞增殖不好还是CD3CD56表达率不好？那24h后可以后多少小时呢，后的太久是否也不好？
比如说我今天晚上9点把细胞种上添加了IFN-r,我是第二天下班前(不到24小时)把CD3和IL-2添加进去呢还是第三天早上上班后添加CD3和IL-2（24小时后又多了12小时）
望前辈指点！！！

作者: 大少爷 时间: 2012-5-26 08:39

一般来说IL-2和CD3要在IFN-r诱导24小时后添加，但是我们经常是没超过24小时添加的，细胞增殖情况和CD3CD56表达率都还行。
细胞你先养着看看，应该没什么问题。下次在做的时候，超过24小时再添加IL-2和CD3，最好再加IL-1，做个粗略的比较。

作者: meixue1130 时间: 2012-5-26 12:27

回复大少爷的帖子
( d8 C. v5 z D# a, j0 v0 n
好的，谢谢！

作者: menghy 时间: 2012-5-28 22:24

最好还是控制在24h之后，不行的也应该在20h后。这样IFN-r诱导的效果要好些。

作者: xinquan15 时间: 2012-6-11 10:14

我们一般都控制在20小时以后，目前对比没有发现太大影响

作者: liutianhua 时间: 2012-6-12 18:03

回复大少爷的帖子
. M- {* S0 V9 O) A$ u
请问楼上cd3+cd56+能做到什么比例？

作者: 大少爷 时间: 2012-6-12 22:02

流式 30%-40%

作者: liutianhua 时间: 2012-6-13 18:48

回复大少爷的帖子- r/ o7 B1 p- X5 ]8 g0 l1 I' j0 d
% m9 v3 T8 u+ C3 @% u x
楼上用的什么培养基？是用什么容器养？板子，瓶子还是袋子？

作者: 大少爷 时间: 2012-6-13 23:59

用培养瓶，培养基就不说了

作者: 113305060 时间: 2012-8-8 16:36

回复大少爷的帖子

您好，我看的培养CIK常规方法都很少加IL-1，请问加与不加IL-1对CIK细胞的诱导有区别吗，区别大吗？谢谢

作者: 大少爷 时间: 2012-8-9 07:54

IL-1可以介导单个核细胞上表达IL-2 受体,与IFN-γ、CD3合用时可以明显提高CIK 的细胞毒效应,但IL-1 对CIK 细胞扩增不起作用。

作者: LL87 时间: 2012-8-19 22:26

回复大少爷的帖子

能否说下具体的步骤？

作者: wwxx66 时间: 2012-11-10 16:33

好多英文文献只是提到了必须24h以后加入比较的好，但没有给出具体的解释。楼主不妨做个对照试验，我们实验室一般没有严格的限制！

作者: jenvy121 时间: 2012-11-14 09:57

回复大少爷的帖子) P. I3 w2 |4 d6 L* W' z* e! d
0 S8 V: T' m O/ F$ u2 T1 B
请问您的细胞数可以扩增多少倍？

作者: sanmao85 时间: 2012-11-19 12:58

学习了

作者: biorocleo 时间: 2012-11-20 11:05

学习了

作者: cheeray 时间: 2012-12-6 13:18

应该在24小时后加，IFN-r可以诱导细胞产生大量的il-2，可以形成更多的结合点。这样的话就可以减少IL-2的用量，另外培养出来的细胞毒活性更好。

欢迎光临干细胞之家 - 中国干细胞行业门户第一站 (http://www.stemcell8.cn/)